1.霍乱弧菌（Vibrio cholerae）
物种名：霍乱弧菌
拉丁学名：Vibrio cholerae
分类学地位：细菌界Bacteria；变形菌门Proteobacteria； γ-变形菌纲Gamma proteobacteria；弧菌目Vibrionales； 弧菌科Vibrionaceae；弧菌属Vibrio
霍乱弧菌（V.cholerae）是霍乱疾病的病原菌。霍乱具有传染性强、发病急、死亡率高等特点，为我国甲类法定传染病。霍乱弧菌两种生物型：古典生物型（Classical bio-type）和埃尔托生物型（El-Tor bio-type），古典生物型通常比E1-Tor生物型引起的感染更严重。根据O抗原的不同，可将霍乱弧菌分为200余个血清群，其中O1群和O139群是致病群[1]。
1.1生物学特性
1.1.1培养特征
霍乱弧菌对营养要求不高，在普通琼脂培养基或蛋白胨水中生长良好，在碱性琼脂平板上经12-18小时培养可形成圆形，透明或半透明的无色，扁平菌落；在 TCBS培养基上生长良好，菌落呈黄色，培养基呈暗绿色（图1）。该菌耐碱不耐酸，适合在pH8.0-9.0的碱性环境中生长，因其他细菌在此环境中不易生长，故常用pH8.4的碱性蛋白胨作为选择培养基[2]。
图 1霍乱弧菌在TCBS平板上的生长情况[3]
1.1.2形态学特征
霍乱弧菌是革兰氏阴性菌，细菌弯曲呈弧形或逗点状，大小为（0.8-3.0）μm×（0.5-1.5）μm，含有用于运动的单极鞭毛，菌体两端钝圆或者稍平，运动极为活泼。霍乱弧菌O1群无荚膜，有普通菌毛和性菌毛，O139群有多糖荚膜，不形成芽胞[2]。
图 2霍乱显微照片
a-革兰氏染色照片[3]、b-扫描电镜照片[3]
1.1.3生化特征
霍乱弧菌氧化酶试验和明胶试验呈阳性，靛基质试验阳性。对干燥、化学消毒剂等抵抗力弱，煮沸10分钟立即死亡，日光照射下一至数小时死亡，在10g碳酸钠中5分钟死亡[4]。O1群霍乱弧菌能发酵蔗糖和甘露糖，不发酵阿拉伯糖。O139霍乱弧菌能发酵葡萄糖、麦芽糖蔗糖和甘露糖，产酸不产气，不发酵肌醇和阿拉伯糖。
1.1.4分子生物学特征
霍乱弧菌包含2个染色体，1号染色体约2.0Mb，2号染色体是一个环形的质粒约1.0Mb，2个染色体共有3885个开放阅读框（ORF）。1号染色体包含重要细胞功能（如转录和翻译）、与致病性相关的霍乱毒素（Choleratoxin，CTX）、以及与毒性调节相关的关键基因。2号染色体上存在与正常细胞功能和中间代谢途径相关的单拷贝基因，此外，还存在着一个巨大的基因捕获系统，在这个区域内存在霍乱弧菌所有重复序列的拷贝和216个开放阅读框，有耐药性相关基因，DNA代谢酶类编码基因，致病和毒素相关基因三大类已知基因[5]。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1 分布与传播
霍乱弧菌的致病性和非致病性菌株均存在于水生生态环境中，是河口、海水中的正常细菌群[6]。霍乱是经粪-口感染的肠道传染病，主要经水、食物及生活密切接触传播。当开放性伤口接触到盐水或咸水（淡水和盐水的混合物，通常出现在河流与海洋交汇的地方）时，这种细菌也会引起感染。霍乱疾病全年均能发生，但多发于夏、秋季的6-10月份[7]。
1.2.2 致病性
霍乱弧菌O1血清群和O139血清群是致病性弧菌中适应力最强的细菌，可在淡水和3%的盐水中生存。在河水中最长可存活20天，在冰中可存活4小时，在水果蔬菜中可存活7天左右[4]。
霍乱的临床表现主要分为潜伏期、泻吐期、脱水期和反应期4个阶段。感染该细菌会导致倡导增加粘液分泌（图3），引起腹泻和呕吐，导致极度脱水，如不及时治疗则会死亡。由于大量水分和电解质丧失而导致严重脱水、代谢性酸中毒、低碱血症和低容量性休克及心律不齐和肾功能衰竭。
图 3霍乱弧菌感染胃肠黏膜病理组织图片[3]
霍乱弧菌的致病因子主要有CTX基因元件、毒力岛和tox R三种。CTX基因元件以噬菌体形式存在，其中ctx AB基因编码霍乱肠毒素（cholera enterotoxin， CT），该毒素是霍乱弧菌的主要致病因子，由 5 个 B 亚基组成，这些 B 亚基形成一个孔隙，以容纳1个A亚基， 其中A亚单位为1个27.2 k D的蛋白质， 被剪切为A1和A2两部分， A1为毒素的生物活性部分， 而B亚单位是毒素与宿主细胞膜受体结合部分的一种非毒素蛋白。毒力岛（V.cholera pathogenity island， VPI）大小为39.5 kb， 主要编码毒素协同调节菌毛（Toxin coergulated pilus， Tcp）和辅助定居因子（Accessory colonization factor，Acf）等毒力因子。tox R为一个32 k Da的跨膜蛋白，主要调控CT和Tcp编码基因的表达[8]。
目前霍乱弧菌已经表现出对氨基糖苷类、磺胺类药、甲氧苄氨嘧、β-内酰胺类、四环素、季胺类化合物以及汞离子的耐药性，甚至导致对多种抗生素同时耐药的特征。
1.3检测方法
（1）传统方法：可将可疑样品接种至碱性蛋白水增菌或在TCBS选择培养基上，进行革兰染色，观察培养和染色结果，并进一步通过生化反应、O1群及O139群血清玻片凝集反应进行鉴定。（2）免疫学技术：利用抗原抗体特异性结合的原理，可用于检测霍乱弧菌，主要包括酶联免疫吸附检测技术、胶体金免疫层析技术等。（3）基因检测技术：根据病原菌的核酸结构及其组成为研究对象，检测中应用比较多的是基因探针技术、荧光定量PCR 技术、16SrRNA 检测技术、环介导等温扩增技术等。（4）变性高效液相色谱（DHPLC）：利用离子对反向高效液相色谱原理，通过一个 DNA分离柱，进行核苷酸片段的分离和分析[9]。
1.4典型案例
仅从1817年有记载以来，全球七次霍乱大流行就导致了 1.4 亿人死亡的惨剧。自2021以来，霍乱病例及其在全球的地理分布有所增加，有23个国家报告了霍乱疫情，主要发生在世卫组织非洲区域和东地中海区域。其中多个国家报告的病例数和病死率高于往年。截至2023年2月1日，至少有18个国家报告了长期疫情[10]。
1.5防治对策
不要吃生的或未煮熟的海鲜产品；确保安全供水，搞好环境卫生；加强食品安全的监督和管理；若有伤口，应避免接触盐水、咸水或涉水、钓鱼或清洗海鲜时的海鲜汁液；如果伤口接触到盐水、咸水、生海鲜或生海鲜汁液，应尽快用肥皂和水清洗伤口[11]。
参考文献
[1] 屠丽红,张曦,陈洪友等.2005-2014年上海市O139群霍乱弧菌的分子特征和耐药性研究[J].疾病监测,2015,30(03):223-227..
[2] 陈殿学主编. 医学免疫学与病原生物学 第2版[M]. 上海：上海科学技术出版社, 2020.05..
[3] https://phil.cdc.gov/QuickSearch.aspx?key=true..
[4] 孙亮，陈江，章荣华主编. 食源性疾病监测知识[M]. 杭州：浙江工商大学出版社, 2021.01..
[5] Trucksis M, Michalski J, Deng Y K, et al. The Vibrio cholerae genome contains two unique circular chromosomes[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1998, 95(24): 14464-14469..
[6] Faruque S M, Nair G B. Molecular ecology of toxigenic Vibrio cholerae[J]. Microbiology and immunology, 2002, 46(2): 59-66..
[7] 阚飙编；詹启敏总主编. 精准预防诊断系列 传染性疾病与精准预防[M]. 上海：上海交通大学出版社, 2020.01..
[8] 王洪敏,马文丽,郑文岭.霍乱弧菌的致病性与流行性研究进展[J].生物化学与生物物理进展,2003(01):38-42..
[9] 夏凡,杨丽君,王静等.病原性海洋弧菌致病机理及其快速检测方法研究进展[J].食品工业科技,2011,32(01):366-370+376..
[10] https://news.un.org/zh/story/2023/02/1115062.
[11] https://www.cdc.gov/cholera/non-01-0139-infections.html.