1.豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae

物种名:豚鼠气单胞菌

拉丁学名:Aeromonas caviae

分类学地位:细菌界Bacteria;变形菌门Proteobacteria;

γ-变形菌纲Gammaproteobacteria;气单胞菌目Aeromonadales;

气单胞菌科Aeromonadaceae;气单胞菌属Aeromonas

豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)属革兰氏阴性短杆菌,是引发人类急性胃肠炎、菌血症及动物感染的重要病原体。该菌通过污染水源或食物传播,夏季高发,临床表现以水样腹泻、腹痛为主,严重者可发展为全身性感染。研究发现其对头孢类抗生素耐药率超50%,但对碳青霉烯类药物敏感。2022年国内首次在山羊猝死病例中分离出该菌株细胞减少为多见,确诊需要病原学证据[1]

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

豚鼠气单胞菌在普通营养琼脂上即可生长,25℃培养48小时菌落直径可达2-3 mm,表面光滑。在血琼脂平板上呈浅灰色,部分有β溶血圈;在大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)上形成直径1-3 mm的圆形、隆起、灰白色不透明菌落;在鉴别培养基RS平板上形成深黄色菌落;在麦康凯培养基上生长良好;在弧菌选择培养基TCBS或在6% NaCl中不生长[2]

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图1 豚鼠气单胞菌在血平板上的菌落图[3]

1.1.2形态学特征

豚鼠气单胞菌为需氧兼性厌氧革兰氏阴性杆菌,两端钝圆呈短杆状。直径大小为0.3-1.0 μm,长为1.0-3.0 μm。豚鼠气单胞菌一般不形成明显荚膜,但某些环境适应株可能具有微荚膜,不产生芽孢,为极生单鞭毛,鞭毛长度是体长的2-3倍[4]

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图2 豚鼠气单胞菌革兰氏染色图[3]

1.1.3生化特征

豚鼠气单胞菌氧化酶试验和触酶试验呈阳性,V-P和赖氨酸试验呈阴性,能发酵葡萄糖、阿拉伯糖和其他糖类,产酸或产酸产气,能还原硝酸盐。豚鼠气单胞菌的最适生长温度为30-37℃,但部分菌株在45℃下仍可存活,但通常不高于55℃;其对β-内酰胺类(如氨苄西林)普遍耐药,但对喹诺酮类(如环丙沙星)、氨基糖苷类(如庆大霉素)较敏感[5]

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

豚鼠气单胞菌广泛分布于自然界中,主要生活在土壤、水体和植物根际等环境中,它是一种人兽共患病原体,可导致免疫功能正常或低下的人患各种感染并发症,同时也是鱼类和其他冷血动物的重要病原体。据报道它可感染草鱼、南方鲇、鲈、罗氏沼虾、南美白对虾等多种水生生物并造成大量死亡[6]

1.2.2致病性

豚鼠气单胞菌有广泛的致病性,感染包括冷血动物在内的多种动物,如:鱼类、禽类及哺乳类,引致败血症或皮肤溃疡等局部感染,是水生动物尤其是鱼类最常见的致病菌,在水温高的夏季可造成暴发流行。人类感染豚鼠气单胞菌引致急性胃肠炎、菌血症等。

豚鼠气单胞菌对机体形成致病包括:黏附、入侵和溶解。刚开始有少量豚鼠气单胞菌致病菌黏附于动物皮肤或肠道,当动物机体免疫力降低表面有创伤时,细菌就会趁机破坏皮肤或肠道黏膜侵入,大量繁殖,形成生物膜,成聚集性黏附模式。豚鼠气单胞菌在生长繁殖过程中会产生大量的代谢产物,包括各种胞外酶和外毒素等,具有很强的溶血活性和细胞毒性,已知胞外产物中有肠毒素、溶血素、蛋白酶、脂肪酶等。其中溶血素作为病原菌的一种毒力因子在细菌致病性和病理损伤机制上发挥着重要的作用。它能使动物红细胞大量溶解,载氧量降低,导致机体贫血、缺氧,并协同其他胞外产物对机体组织结构造成广泛性损伤,导致各器官的功能降低,甚至丧失,最后引起死亡[4]

1.3检测方法

  1. 传统方法:利用电镜技术对病原菌进行形态学观察是最简单的鉴定方法。此外,也可通过培养观察鉴定其生理生化特征来判别该菌[7]
  2. 免疫学方法:主要是血清学方法利用抗原与抗体能发生特异性结合的原理来鉴定。如:间接ELISA检测法、单克隆抗体-胶体金检测方法以及胶体金免疫层析试纸条等[7]
  3. 分子生物学方法:利用细菌16S rDNA基因通用引物进行PCR扩增,利用DNA提取试剂盒提取菌株纯培养物的基因组作为模板,PCR反应体系50 μL:2×Rapid Taq Master Mix 25 μL,上、下游引物(10 μmol/L)各4 μL,模板4 μL,ddH2O 13 μL。PCR扩增程序:95℃预变性5 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸45 s,共35个循环;72℃延伸7 min;而后进行测序鉴定[3]

表1 PCR引物序列[3]

名称 引物序列
F 5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′
R 5′-ACGGCTACCTTGTTACGACTT-3′

1.4典型案例

水生环境在世界范围内用于供水、能源生产、灌溉、导航、水产养殖以及初级和次级接触活动。巴西塞阿拉科科河受到人类活动的影响,改变了其特征和发展,为了检测其变化,对其进行了水质监测。进行了多次采样以及细菌鉴定,在水中检测出了多种气单胞菌,其中就包括豚鼠气单胞菌。一般来说,气单胞菌属是鱼类和海产品中最常见的污染物,这在一定程度上可以解释为它们在水生环境中无处不在的性质[8]

1.5防治对策

豚鼠气单胞菌可导致人和动物发生多种疾病,其宿主分布比较广泛,为了预防疾病的发生,应提前进行防控、切断传播途径,这是病原控制的关键。在日常生活中尽量不去接触可能感染的动物,注意个人卫生,勤洗手,不生饮未经处理的自然水源(如河水、湖水)。此外,豚鼠气单胞菌对头孢曲松、氯霉素、庆大霉素、氟苯尼考等药物有较高的敏感性。

参考文献

  1. https://baike.baidu.com/item/豚鼠气单胞菌/12734006.
  2. 陆承平. 兽医微生物学. 北京: 中国农业出版社, 2001.
  3. 王迎平, 赵静贤, 尚佳富 等. 大口黑鲈源豚鼠气单胞菌的分离鉴定及全基因组分析. 中国畜牧兽医, 2024, 51: 1706-1716.
  4. 袁中华, 宋海超, 刘俊彤 等. 豚鼠气单胞菌研究进展. 动物医学进展, 2024, 45: 106-110.
  5. 吕厚东, 吴爱武. 临床微生物学检验技术. 湖北: 华中科技大学出版社, 2020.
  6. 周丽颖, 姜姿妍, 钱且奇 等. 中华绒螯蟹病原豚鼠气单胞菌的鉴定及其致病性分析. 淡水渔业, 2022, 52: 58-65.
  7. 王雨辰, 雷宁, 郝贵杰 等. 罗氏沼虾致病性豚鼠气单胞菌的分离鉴定及其特性分析. 海洋与湖沼, 2023, 54: 866-874.
  8. Norma SE, Fatima CT, Regine HS et al. Characterization of Aeromonas species isolated from an estuarine environment. Brazilian journal of microbiology, 2010, 41: 452-460.

 

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