支气管博德特菌（Bordetella bronchialis）
物种名：支气管博德特菌
拉丁学名：Bordetella bronchialis
分类学地位：细菌界Bacteria；假单胞菌门Pseudomonadota；
β-变形菌纲Betaproteobacteria；伯克霍尔德氏菌目Burkholderiales；
产碱杆菌科Alcaligenaceae；博德特菌属Bordetella
支气管博德特菌最早由Ferry于1910年从患呼吸道疾病的犬体内分离得到，最初命名为支气管败血杆菌。早期分类将其归入败血杆菌属，后续基于生化特征与核酸同源性分析，发现该菌与百日咳病原菌亲缘关系相近。1952年，该种被归入新建的博德特菌属，正式命名为支气管博德特菌。该菌是博德特菌属宿主范围最广的物种，与百日咳博德特菌、副百日咳博德特菌拥有共同祖先。
1.1生物学特性
1.1.1培养特征
支气管博德特菌严格需氧菌，最适生长温度35-37℃，无需X、V生长因子，可在多种普通培养基生长，如血琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、鲍-金培养基、TSA/营养琼脂培养基等，一般培养48-72 h观察典型菌落形态。支气管博德特菌可在血琼脂板上以35-37℃过夜生长，菌落小，灰白色，光滑且有光泽，通常没有或仅有一小段溶血区[1]。在麦康凯琼脂生长良好，不发酵乳糖，无色或浅灰色光滑菌落，常使培养基轻微变黄。
支气管博德特菌在各种普通培养基上均易生长，但是极易发生菌相变异。在鲍-姜（Bordet-Gengou）氏培养基上菌落光滑、凸起、湿润、半透明、珍珠状。在该基础培养基中加入5%-10%的血液或裂解红血球液及优质混合蛋白胨，并在无凝集水的琼脂表面上于潮湿空气中培养，形成典型的I相菌呈珍珠状或半圆形、直径约小于1mm、白色、光滑致密、围绕周边界限多不清楚的明显的β-溶血环。在培养条件不适或多次传代后出现II相或III相菌落，III相菌落灰白、扁平、光滑、大于I相菌落、质地稀软、不溶血[2]。
图1 支气管博德特菌培养形态
A：在鲍-姜氏培养基上的β-溶血环[3]，B：在TSA培养基的生长情况[3]
1.1.2形态学特征
支气管博德特菌为革兰阴性细小球杆菌（球杆菌），菌体大小（0.2-0.5）μm×（0.5-2.0）μm；菌体两端钝圆，多单个散在或两两成对排列，极少形成短链；无芽孢[4]。
吕氏美蓝染色可见典型两极浓染特征；野生初代Ⅰ相有毒菌株可有薄层荚膜，多次人工传代后荚膜消失。菌体具有周生鞭毛，有运动能力（区分百日咳鲍特菌最关键形态特征）；菌体表面存在菌毛，介导细菌黏附呼吸道上皮。存在明显相变异现象：Ⅰ相强毒株菌体形态规整；长期传代后的Ⅱ、Ⅲ相菌株可出现菌体多形性，偶见丝状菌体。
图2 支气管博德特菌革兰氏染色图[5]
1.1.3生化特征
支气管博德特菌为专性需氧、呼吸型代谢，不发酵任何碳水化合物。氧化酶阳性、触酶（过氧化氢酶）阳性、尿素酶阳性、硝酸盐还原试验阳性、可利用枸橼酸盐[4]；不产生吲哚（靛基质）、不产生硫化氢（H₂S），甲基红（MR）、VP试验阴性；不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖等各类糖类[5]。
1.1.4分子生物学特征
支气管博德特菌的基因组为单环状双链DNA，G+C摩尔分数为59.6%-68%；标准参考株RB50全基因组测序完成，基因组约5.3Mb。核心调控系统bvgAS双组分调控系统，全局调控几乎所有毒力基因表达，介导Bvg相转换，是博德特菌属标志性基因座。fhaB（丝状血凝素）、prn（百日咳黏附素）、cyaA（腺苷酸环化酶溶血素）、dnt（皮肤坏死毒素）为毒力标志基因[6]。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1分布与传播
支气管博德特菌在世界各地广泛存在、传播广泛，常呈地方性流行，所引起的慢性疾病为多，急性败血性死亡较少。支气管博德特菌主要寄生于动物呼吸道，通过呼吸道传播，随咳嗽、喷嚏飞沫污染饲料、饮水、笼舍和空气。该菌可感染犬、兔等哺乳动物及鸡、鹅、鸭等禽类，引发犬传染性呼吸道疾病复合体（CIRDC）等疾病，亦可感染与患病动物密切接触的人类[6]。
1.2.2致病性
支气管博德特菌宿主范围广泛，可感染多种哺乳动物，属于动物源性条件致病菌，具备人畜共患病潜力。该菌主要定植于宿主上呼吸道纤毛上皮，经呼吸道气溶胶、密切接触传播；既可引发急性呼吸道炎症，也可形成长期无症状带菌、持续排菌[4]。毒力表达受BvgAS双组分调控系统调控，Ⅰ相野生菌株毒力最强，人工多次传代发生相变异后毒力显著下降[6]。在动物宿主中，可引起犬传染性气管支气管炎（犬窝咳）、猪萎缩性鼻炎、兔鼻炎与肺炎、多种野生动物出血性肺炎；常与巴氏杆菌、支原体、病毒发生混合感染，加重呼吸道损伤。人感染病例少见，主要发生于免疫缺陷人群，少数免疫健全人群接触患病动物后可出现慢性顽固性咳嗽、支气管炎，重症可发展为肺炎、胸腔积液。
其致病机制主要是依靠丝状血凝素、百日咳黏附素、菌毛完成上皮黏附；分泌腺苷酸环化酶溶血素抑制吞噬细胞功能；皮肤坏死毒素可造成细胞骨架紊乱、组织损伤；同时借助Ⅲ型分泌系统介导宿主细胞病变。细菌可抑制呼吸道纤毛摆动、造成上皮坏死脱落，并且能够形成生物膜，实现长期持续性定植，康复动物可长期隐性带菌、持续向外排菌，成为群体内持续传染源。菌株间毒力差异显著，与毒力基因谱、菌株基因组可塑性密切相关[6]。
1.3检测方法
（1）传统方法：支气管博德特菌实验室检测手段主要分为传统分离鉴定技术与分子生物学检测两大类。细菌分离培养是诊断金标准，可使用鲍-金琼脂、麦康凯琼脂、TSA血清琼脂进行初代分离，结合革兰染色、生化试验完成初步鉴定，但该方法耗时较长，在细菌载量低、动物前期使用抗生素的样本中检出率显著下降[7]。
（2）分子生物学方法：刘燕等参考GenBank中公布的fimN基因序列设计了一对特异性引物，建立了常规PCR检测方法。该方法扩增产物大小为387 bp。经优化后确定最佳反应条件为：退火温度52°C、MgCl₂浓度2.0 mM、引物加入量10 pM。特异性试验显示，该方法与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、魏氏梭菌和巴氏杆菌均无交叉反应，特异性良好。敏感性试验表明，该方法可检测的最低DNA浓度为10 pg。对20株临床分离可疑菌进行检测，结果与生化鉴定一致[8]。
表1 支气管博德特菌PCR引物[8]
| 名称 | 序列（5′→3′） |
| F | CGCAGCCCAATCACATCA |
| R | TGACTTCCTTCTTGCCCTGTT |
1.4典型案例
采集苏格兰近郊湖泊、池塘天然无营养淡水，人工接入支气管博德特菌特低浓度菌液（10³ CFU/mL）模拟动物排泄物污染水体场景；10℃低温淡水环境下细菌持续增殖至10⁶-10⁷ CFU/mL，活菌稳定存活24周以上不衰减；37℃温水水体同样可长期存活。证实自然淡水池塘、湖泊可形成水体环境储存库，污染水体长期具备动物感染传播风险[9]。
1.5防治对策
支气管博德特菌防治遵循对症支持、抗菌干预、疫苗免疫、生物安全管控、人兽共患风险阻断一体化策略。日常生物安全管理需控制饲养密度、强化通风换气，使用季铵盐、稀释次氯酸钠定期消毒污染物。此外，该菌存在人畜共患风险，免疫缺陷人群需避免接触患病宠物，家养伴侣动物定期完成疫苗接种可显著降低跨物种感染概率。噬菌体、新型佐剂亚单位疫苗、纳米多价疫苗为近年新型防控方向，可作为抗生素替代方案缓解菌株耐药压力[10]。
参考文献
[1] Kadlec K, Schwarz S. Antimicrobial Resistance in Bordetella bronchiseptica. Microbiology Spectrum, 2018, 6: 10.
[2] 裴洁, 何华, 赵战勤 等. 支气管败血波氏杆菌的研究进展. 畜牧兽医科技信息, 2006, 2: 4-6.
[3] 张青娴, 徐引弟, 王治方 等. 河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学研究. 山西农业科学, 2018, 46: 1378-1381.
[4] 伍茜, 李雄婕, 喻东 等. 林麝源支气管败血波氏杆菌FMDBb1株的分离鉴定及全基因组序列分析. 微生物学通报, 2021, 48: 4731-4741.
[5] 赵梦溪, 聂民财, 徐雷 等. 四川省猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因和毒力基因检测分析. 云南农业大学学报, 2023, 38: 212-219.
[6] Miguelena CB, De LK, Swaminathan G et al. Bordetella bronchiseptica and Bordetella pertussis: Similarities and Differences in Infection, Immuno-Modulation, and Vaccine Considerations. Clinical Microbiology Reviews, 2023, 36: e00164.
[7] Solikah TI, Lesttari EA, Ernadiani AL et al. Bordetella bronchiseptica in Canine Respiratory Disease: A Review. Journal of Advanced Veterinary Research, 2026, 16: 641-647.
[8] 刘燕, 章春桃, 韦强 等. 兔支气管败血波氏杆菌PCR快速检测方法的建立及应用. 中国养兔杂志, 2012, 1: 8-10.
[9] Porter JF, Wardlaw AC. Long-term survival of Bordetella bronchiseptica in lakewater and in buffered saline without added nutrients. FEMS Microbiology Letters, 1993, 110: 33-36.
[10] Cui X, Xiang Q, Huang Y et al. Mixed Th1/Th2/Th17 Responses Induced by Plant Oil Adjuvant-Based B. bronchiseptica Vaccine in Mice, with Mechanisms Unraveled by RNA-Seq, 16S rRNA and Metabolomics. Vaccines, 2024,12: 1182.