**醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）**

物种名：醋酸钙不动杆菌

拉丁学名：Acinetobacter calcoaceticus

分类学地位：细菌界Bacteria；假单胞菌门Pseudomonadota；

γ-变形菌纲Gammaproteobacteria；莫拉菌目Moraxellales；

莫拉菌科Moraxellaceae；不动杆菌属Acinetobacter

醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）主要存在于水体和土壤中，易在潮湿环境中生存，也存在于健康人的皮肤、呼吸道、泌尿生殖道，为条件致病菌。感染本菌易导致脑膜炎、中耳炎、败血症和泌尿生殖系感染等疾病。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

醋酸钙不动杆菌为需氧菌，最适生长温度35℃，无特殊营养要求，普通培养基生长良好。在血琼脂平板上经18-24小时培养后，可见圆形、凸起、灰白色、光滑、边缘整齐的菌落，并且醋酸钙不动杆菌的菌落相较于不动杆菌属的其他种会较大（图1）^[1]。

图1 醋酸钙不动杆菌在血平板上的培养结果^[2]

1.1.2形态学特征

本菌为革兰阴性菌，但因为革兰氏染色不易脱色，很容易呈假阳性。菌体呈球状或球杆状，单个或成双排列，偶尔呈丝状或链状，常似奈瑟氏菌，无鞭毛，无芽孢^[1]。

图2 醋酸钙不动杆菌显微照片

A：革兰氏染色照片^[3]，B：扫描电镜照片^[4]

1.1.3生化特征

醋酸钙不动杆菌可氧化葡萄糖和乳糖，但不氧化木糖；本菌精氨酸双水解酶、鸟氨酸脱羧酶、苯丙氨酸脱氨酶均阳性；不液化明胶，丙二酸盐利用试验、柠檬酸盐利用试验阳性^[1]。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

醋酸钙不动杆菌常存在于自然界土壤、水和医院环境中，易在潮湿的环境中生存，也存在于健康人的皮肤、呼吸道、泌尿生殖道，为条件致病菌。传播途径主要是接触传播和空气传播，以及通过吸入受污染的水或食物进入消化道而传播^[5]。

1.2.2致病性

近年来，不动杆菌属在非发酵菌中其感染率仅次于铜绿假单胞菌而占第二位，本菌是医源性感染脑膜炎、中耳炎、败血症和泌尿生殖系感染的主要病原菌^[1]。

醋酸钙不动杆菌的致病因子包括细菌胶囊、细菌腺毒素、附着因子以及分泌的其他蛋白质等。这些因子可以帮助菌株抵抗宿主的免疫系统，使菌株进入宿主细胞并引发其病理反应。常有发热、咳嗽、胸痛、气急及血痰等表现，偶有肺脓肿及渗出性胸膜炎表现^[5]。

近些年来随着大量激素和广谱抗菌药物在临床的广泛使用，导致不动杆菌的分离率越来越高，特别是醋酸钙不动菌，该菌耐药现象严重，对诺氟沙星、哌拉西林、环丙沙星、头孢曲松、头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星的耐药性均高于70%，对临床治疗和预防本菌的感染造成了很大困难。但本菌对多粘菌素B、美满霉素、舒巴坦与β内酰胺类敏感性较好，可用其进行治疗^[6]。

1.3检测方法

（1）传统方法：按要求处理样品，确保样品的代表性和均一性，去除杂质等干扰物质。样品制备后接种至营养肉汤培养基增菌培养，取增菌液划线接种至异养硝化固体培养基或好氧反硝化固体培养基培养，挑取典型可疑菌落（乳白色、不透明、表面光滑、边缘平整）进行革兰染色，观察结果，并进一步通过氧化酶、接触酶、葡萄糖利用等生理生化试验及血清学凝集试验完成鉴定^[7]。

（2）分子生物学检测方法：使用DNeasy试剂盒或煮沸法制备模板DNA，配制醋酸钙不动杆菌特异性多重PCR反应体系：加入1×Taq PCR Master Mix、0.2 µM醋酸钙不动杆菌特异性引物D14和D19以及模板DNA。PCR反应程序为：94°C预变性2分钟，随后进行30个循环（94°C变性1分钟、56°C退火30秒、72°C延伸1分钟），最后在72°C最终延伸10分钟。反应结束后，取PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶中电泳，经溴化乙锭染色后于紫外灯下观察。若出现大小为428 bp的特异性条带，则可判定为醋酸钙不动杆菌。若需进一步确认，可使用引物D14与gyrB-2对该菌株DNA重新进行PCR扩增并纯化产物，对扩增片段进行测序，将序列与数据库中的醋酸钙不动杆菌gyrB基因序列进行比对，完成最终鉴定^[8]。

表1 PCR引物序列

引物	序列（5´→3´）
D14	GACAACAGTTATAGGTTTCAGGTG
D19	CCGCTATCTGTTACCGCAGTA
gyrB-2	CTTACGAGGGCTCATTTCAC

1.4典型案例

Bifulco^[9]对英格兰普雷斯顿的农村地下水进行了细菌学调查，在38%的地下水样本中检测到了不动杆菌属，其平均密度为8 CFU/100 mL，在未检测到总大肠菌群的样本中，仍然在16%的样本中检测到了不动杆菌属的存在。并且发现从井水中分离得到的醋酸钙不动杆菌的毒性与临床上分离得到的菌株相差无几，表明从地下水中分离出的醋酸钙不动杆菌菌株具有一定程度的致病潜力，这引起人们对于地下水中存在本菌的重视。

1.5防治对策

醋酸钙不动杆菌易通过进入人体消化道、呼吸道等危害人的健康，也容易通过污染医疗器具而引起医源性感染，所以在日常生活中要注意卫生安全，医院有严格遵守无菌操作。若感染本菌，治疗可用多粘菌素B和美满霉素等。

参考文献

[1] 俞树荣. 微生物学和微生物学检验第2版. 北京: 人民卫生出版社, 1988.

[2] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=12373.

[3] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=1260.

[4] Microbe Wiki. https://microbewiki.kenyon.edu/index.php/File:Acinetobactercalcoaceticus.png.

[5] Bergogne-Bérézin E, Towner KJ. Acinetobacter spp. as nosocomial pathogens: microbiological, clinical, and epidemiological features. Clinical Microbiology Reviews, 1996, 9: 148-165.

[6] 袁文清. 417株醋酸钙不动杆菌的临床分布及耐药性研究. 中国实用医药, 2013, 8: 154-155.

[7] 张泽锟, 闫勇, 郭静等. 异养硝化-好氧反硝化菌株的分离、鉴定及其氨氮降解过程初探. 中国酿造, 2022, 41: 83-88.

[8] Higgins P G, Lehmann M, Wisplinghoff H et al. gyrB multiplex PCR to differentiate between Acinetobacter calcoaceticus and Acinetobacter genomic species 3. Journal of Clinical Microbiology, 2010, 48: 4592-4594.

[9] Bifulco JM, Shirey JJ, Bissonnette GK. Detection of Acinetobacter spp. in rural drinking water supplies. Applied And Environmental Microbiology, 1989, 55: 2214-2219.