登革热病毒（Dengue virus）

物种名：登革热病毒

拉丁学名：Dengue virus

分类学地位：正RNA病毒界Orthornavirae；双链RNA病毒门Duplornaviricota；

黄病毒超群纲纲Flasuviricetes；黄热病毒目Amarillovirales；

黄病毒科Flaviviridae；黄病毒属Flavivirus

登革热病毒（Dengue virus）是引起登革热的病原体。登革热是由蚊子传播，以发热、头痛、肌肉和关节疼痛、淋巴结肿大，并伴有皮肤出血为特点的传染病。该病毒主要是通过蚊子在水环境中进行传播，当水源受到污染时，会为伊蚊提供滋生的环境，进而增加伊蚊的数量，使得登革热病毒的传播机会增大。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

登革热病毒可在多种动物组织细胞内繁殖，如：非洲绿猴肾、恒河肾、猪肾和原代地鼠肾等细胞；也可以在HeLa及KB传代细胞中增殖。登革热病毒还可以在鸡胚中生长，或在伊蚊体内和伊蚊细胞株中繁殖。如果出现病变，一般病毒滴度较高^[1]。

1.1.2形态学特征

登革热病毒颗粒呈球形，直径约55 nm。病毒颗粒外被脂蛋白包膜，并具有包膜刺突。病毒包膜的外层含有包膜蛋白E，内层含有膜蛋白M。病毒核心是由病毒的单股、正链RNA（+ssRNA）和病毒衣壳蛋白C共同组成的20面体核衣壳结构。病毒RNA具感染性^[1]。

图1 登革热病毒在冷冻电子显微镜的保护膜及膜蛋白（A）^[2]及在扫描电镜下形态特征(B)^[3]

1.1.3生化特征

登革热病毒体外存活能力较强，但其对热、酸碱度等敏感，温度越高、pH值越低，其活性越弱。在室温条件下，登革热病毒在水和土壤中可存活1-2天，在血液中可存活3-5天。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

登革热病毒呈地方性流行，常爆发于儿童及人口聚集的市镇，一年四季均可爆发，无特定的流行季节。传染源和贮存宿主为人，传播媒介是埃及伊蚊和白纹伊蚊，伊蚊在水中产卵和孵化，会导致人类患病风险增加^[4]。

1.2.2致病性

登革热病毒入侵机体后，一般经过5-7天的潜伏期后发病，多为突然发作，先是畏寒，伴随高热，全身关节、肌肉和骨的部位出现病觉，使病人难以站立，行动困难，面部潮红，眼结合膜充血或出血或有血斑，轻者3-5天内恢复，病情中度者，发热可持续一周后逐渐愈，重症者发热持续2周以上，更严重者，血压下降，休克，甚至中枢衰竭而死亡^[5]。

登革热病毒具有较强的致病性，病毒经蚊虫叮咬后进入人体，先在单核吞噬细胞系统和淋巴组织中增殖和复制两次，形成第一次和第二次病毒血症。体液中的登革病毒抗体与登革病毒形成免疫复合物，激活补体系统，导致血管通透性增加，同时抑制骨髓中的白细胞和血小板系统，导致出血倾向和白细胞、血小板减少^[6]。病理改变涉及全身脏器，以退行性变和出血为主，包括肝、心、肾、脑等退行性变，关节周围水肿，心包、心内膜、胸膜、胃肠黏膜、肌肉、皮肤，神经系统不同程度的出血。皮疹内血管内皮肿胀，血管周围水肿及单核细胞浸润，瘀斑中有广泛血管溢血。脑型患者尸检可见蛛网膜下隙灶性出血、脑实质灶性出血，脑水肿及脑软化等。重症患者可有肝小叶灶性坏死及淤胆、小叶性肺炎、肺小脓肿形成等。

1.3检测方法

（1）传统方法：直接从临床标本中分离出登革热病毒是确诊登革热的可靠方法。国内用乳鼠脑内接种、哺乳动物细胞及无脊椎动物细胞培养分离登革病毒，并分离出4个型别的登革病毒，目前最常用的分离细胞为C6/36细胞。巨蚊胸腔接种及巨蚊幼虫脑内接种能提高分离阳性率，并能定型^[5]。

（2）分子生物学法：根据登革热病毒的高度保守区进行引物设计，提取样本RNA后，以通用引物对样本进行RT-PCR扩增，同时以SYBR Green I标记进行实时荧光定量PCR扩增。反应体系包括SYBR Green I RT-PCR Master Mix、上下游引物、模板RNA等。扩增程序为：50℃ 20 min（反转录）；95℃ 10 min（预变性）；94℃ 15 s，59℃ 20 s，72℃ 30 s，共45个循环。每个循环结束后测定荧光信号，得到扩增曲线。扩增结束后进行熔点曲线分析，以验证扩增产物的特异性。该方法具有较高的特异性和灵敏度，适用于登革热病毒的早期监测^[7]。具体引物序列如下：

表1 登革热病毒RT-PCR和Real-time PCR引物序列

名称	序列
F	5′-AGTCGACTCCAACCAGAACGG-3′
R	5′-ATTCTTCTCTCCCATCCGCCTCT-3′

1.4典型案例

登革热等病毒主要通过受感染的伊蚊叮咬进行传播。Haldar^[8]等总结了废水中的登革热病毒在感染宿主中的病毒释放、动力学以及登革热监测方法；登革热病毒可通过感染者的尿液、唾液、精液和阴道分泌物等体液进入废水系统。这些体液通过厕所、排水系统和污水管网进入城市废水，使得废水成为病毒传播的潜在媒介。除此之外，还指出了登革热病毒在废水和回收水中持久性及回收方面存在的知识空白。

1.5防治对策

登革热是以伊蚊作为媒介的急性传染病，预防的重点应为灭蚊。尤其是消灭伊蚊的滋生地带。对患者应予隔离治疗。在治疗方面，目前尚无特效药物，早期患者强调休息，采取对症治疗为主。

参考文献

[1] 章育正, 吕乃群. 医学微生物学与免疫学. 上海: 上海科学技术出版社, 1996.

[2] Image Gallery: Protective membrane and membrane proteins of the dengue virus visualized with cryo-EM. https://nigms.nih.gov/image-gallery/3756

[3] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=12493.

[4] 高娜, 盛子洋, 安静 等. 登革热疾病负担及预防控制策略中国专家共识. 中国人兽共患病学报, 2024, 40: 489-497.

[5] Kaslow RA, Stanberry LR, Powers AM et al. Viral Infections of Humans. Springer, 2023.

[6] Sinha S, Singh K, Ravi Kumar YS et al. Dengue virus pathogenesis and host molecular machineries. Journal of Biomedical Science, 2024, 31: 43.

[7] 王佃鹏, 朱玉兰, 吴兵 等. SYBR Green I荧光PCR检测登革热病毒基因方法的建立. 中国热带医学, 2007, 7: 1743-1744.

[8] Haldar T, Katarmal P, Roy B et al. Dengue and chikungunya virus dynamics, identification, and monitoring in wastewater. Environmental Monitoring and Assessment, 2024, 196: 1166.