迪斯帕内阿米巴(Entamoeba dispar)
物种名:迪斯帕内阿米巴
拉丁学名:Entamoeba dispar
分类学地位:真核生物域Eukaryota;阿米巴门Amoebozoa; 阿米巴纲Archamoebae;鞭毛阿米巴目Mastigamoebida; 内阿米巴科Entamoebidae;内阿米巴属Entamoeba
迪斯帕内阿米巴(Entamoeba dispar)属非侵袭性肠道共栖型原虫,是与溶组织内阿米巴形态、生活史相似的另一虫种。全世界约有5亿人感染阿米巴,其中多数为迪斯帕内阿米巴感染。迪斯帕内阿米巴常寄生在大肠腔或黏膜表面,无侵袭性(艾滋病患者感染也不引起临床症状)。
1.1生物学特性
1.1.1生活史
迪斯帕内阿米巴分滋养体和包囊两个不同时期,成熟的4核包囊为感染期。成熟的4核包囊随宿主粪便排出后污染食物或饮用水,经口感染新宿主,移行至回肠末端或结肠后,在肠内酶的作用下,脱囊分裂,形成4个单核滋养体,再以二分裂法不断增殖[1]。
1.1.2形态学特征
未成熟迪斯帕内阿米巴包囊多为单核,圆球形,直径约15 μm,有拟染色体和糖原泡,有囊壁。同时,成熟迪斯帕内阿米巴包囊有4个泡状核,直径13 μm左右,内外质分界明显。迪斯帕内阿米巴滋养体,折光性较强。虫体圆形或椭圆形,直径约9-20 μm,进行二分裂繁殖。能运动的滋养体,多呈长葫芦形,具透明伪足,以翻滚摆动和旋转的方式行定向运动[2]。

图1 迪斯帕内阿米巴显微照片[2]
A:包囊(400×),B:碘染后的包囊(400×)
C:分裂中的滋养体(400×),D:48 h的滋养体(100×)
1.1.3生化特征
迪斯帕内阿米巴滋养体在外环境中很快死亡,包囊在外界环境中抵抗力较强,在潮湿低温环境下可存活12天以上,但对干燥、高温和化学药品的抵抗力不强[1]。
迪斯帕内阿米巴为肠道寄生性原虫,不能在普通固体培养基上生长。其体外培养需依赖特定的培养体系,多采用含血清的液体或半固体培养基(如TYI-S-33培养基)以维持滋养体的生长与增殖[3, 4]。该虫可在伴生细菌存在的条件下进行异养培养(xenic culture),但在无菌或单菌条件下生长较为困难,仅少数虫株可稳定体外培养。培养过程中主要以滋养体形式进行二分裂增殖,其营养来源主要依赖细菌及培养基中的有机成分[3]。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1分布与传播
迪斯帕内阿米巴呈世界性分布,感染人数众多,尤以热带和亚热带地区高发,与文化水平低、卫生状况差密切相关。其传播途径主要为粪-口传播,被污染的食品、饮水中的感染性包囊经口摄入是主要方式,其中包囊污染水源是导致地区性暴发流行和高感染率的主要原因。此外,污染的手、食物、用具以及苍蝇、蟑螂等也可机械携带包囊传播疾病。食品加工人员亦为常见感染源。在发达国家,男性同性恋者、旅游者和移民为高发人群,肛-口接触或性行为是重要传播方式[5]。
1.2.2致病性
迪斯帕内阿米巴通常被认为是一种非致病性肠道寄生原虫,主要寄居于人体结肠腔内,以共生或腐生方式存在,不侵入肠黏膜组织。目前的主流观点认为,其本身不引起典型阿米巴病(amebiasis),也不导致肠道组织破坏或远处器官损伤[3]。
在人群中,迪斯帕内阿米巴感染较为常见,感染后,包囊在小肠内脱囊形成滋养体,随后定植于结肠腔内,以细菌和肠内容物为营养来源[6]。多数感染者为无症状携带者,不表现出明显的临床症状。在部分报道中,个别感染者可能出现轻度胃肠道不适,如腹胀、轻度腹泻或排便习惯改变等,但这些症状通常较轻且缺乏特异性,尚无充分证据证明其与迪斯帕内阿米巴的直接致病作用存在明确因果关系[3, 6]。
与典型致病性阿米巴不同,迪斯帕内阿米巴不侵入肠壁,不形成烧瓶状溃疡,也不会引起阿米巴性痢疾或肝脓肿等侵袭性疾病[3, 6]。其滋养体缺乏有效的组织破坏能力,通常不会引发明显的炎症反应或免疫损伤[4]。
1.3检测方法
(1)传统方法:用两种显微镜检测方法对粪便样本中的内阿米巴复合体(含迪斯帕内阿米巴, Entamoeba dispar)开展检测:甲醛-醚沉淀法结合卢戈碘液染色,以及改良三色染色法。甲醛-醚沉淀法操作简便,通过离心富集包囊后染色镜检;三色染色法可对固定涂片染色,清晰显示原虫内部结构,辅助形态学鉴定。结果显示,单独使用三色染色法检出率为13.4%,优于甲醛-醚沉淀法的11.2%,二者联合使用检出率提升至18.6%。传统方法无法从种水平区分迪斯帕内阿米巴与溶组织内阿米巴,但因成本低廉、设备简单,适用于流行病学调查及基层实验室筛查[7]。
(2)分子生物学方法:研究对泰国巴吞他尼府运河地表水样本中的迪斯帕内阿米巴采用多重荧光定量PCR方法检测。先对2 L水样离心浓缩,经裂解、反复冻融、蛋白酶K消化与超声处理后提取DNA,以SSU rRNA为靶基因进行多重qPCR扩增,通过熔解曲线分析区分迪斯帕内阿米巴与溶组织内阿米巴,迪斯帕内阿米巴扩增产物Tm值为55.5-57.5℃。该qPCR方法特异性强,可实现水环境中迪斯帕内阿米巴的快速、准确分子鉴定[8]。
表1 迪斯帕内阿米巴多重qPCR引物与探针序列
| 名称 | 序列(5′→3′) |
| EhdmF | CGAAAGCATTTCACTCAACTG |
| EhdmR | TCCCCCTGAAGTCCATAAACTC |
| Ehdm-FL | ACTATAAACGATGTCAACAAGGATTGGATGAAA-FITC |
1.4典型案例
2025年,泰国玛希隆大学的一项新研究显示,在巴吞他尼府运河采集的140份地表水样本中,有14%检测出迪斯帕内阿米巴,而溶组织内阿米巴等其他三种致病性阿米巴均未检出。尽管该寄生虫通常被认为不致病,但部分地区已有感染者出现肠道症状。研究人员指出,水源污染可能带来感染风险,建议加强日常监测[8]。
1.5防治对策
防制应采取综合措施防止感染,包括对粪便进行无害化处理,以杀灭包囊;保护水源、食物免受污染:搞好环境卫生和驱除有害昆虫:加强健康教育,以提高自我保护能力[1]。
参考文献
[1] 刘尔翔, 王恒. 中华医学百科全书 基础医学 医学寄生虫学. 北京: 中国协和医科大学出版社, 2023.
[2] 陈蓉, 邹莹, 陈楠 等. 黑猩猩迪斯帕内阿米巴分离培养与鉴定. 畜牧与兽医, 2016, 48: 73-76.
[3] Fotedar R, Stark D, Beebe N et al. Laboratory diagnostic techniques for Entamoeba species. Clin Microbiol Rev, 2007, 20: 511-532.
[4] Clark CG, Diamond LS. Methods for cultivation of luminal parasitic protists of clinical importance. Clin Microbiol Rev, 2002, 15: 329-341.
[5] 柳增善. 食品病原微生物学. 北京: 中国轻工业出版社, 2007.
[6] Stanley SL Jr. Amoebiasis. The Lancet, 2003, 361: 1025-1034.
[7] Anuar T S, Al-Mekhlafi H M, Ghani M K A et al. Evaluation of formalin-ether sedimentation and trichrome staining techniques: Its effectiveness in detecting Entamoeba histolytica/dispar/moshkovskii in stool samples. Journal of Microbiological Methods, 2013, 92: 344-348.
[8] Pinthong N, Nitatsukprasert C, Rattaprasert P et al. Molecular detection of Entamoeba dispar from surface water samples in Thailand. Southeast Asian Journal of Tropical Medicine and Public Health, 2025, 56: 518-532.
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