布氏弓形菌(Aliarcobacter butzleri

物种名:布氏弓形菌

拉丁学名:Aliarcobacter butzleri

分类学地位:细菌界Bacteria;弯曲杆菌门Campylobacterota;

ε-变形菌纲Epsilonproteobacteria;弯曲杆菌目Campylobacterales;

弓形菌科Arcobacteraceae;弓形菌属Aliarcobacter

布氏弓形菌(Aliarcobacter butzleri)主要存在于一些未经处理的水中,被认为是引起肠胃炎的新兴人类病原体,可引起人类腹痛、胃肠炎和急性腹泻或长期水样腹泻、败血症和菌血症,以及动物肠炎和流产。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

布氏弓形菌的培养特征与嗜低温弓形菌相识,该菌属于微需氧菌,需在CO2和O2环境下才能生长良好,最适温度为25-30℃。但布氏弓形菌在42℃时有可能生长,而嗜低温弓形菌不生长。布氏弓形菌可在麦康凯平板上生长,在血平板上不形成溶血[1]

1.1.2形态学特征

布氏弓形菌为革兰氏阴性菌,无芽胞、微弯曲、弯曲、S形或螺旋样杆菌,一端或两端具单鞭毛,运动活泼[2]

图1 布氏弓形菌显微照片

A:革兰氏染色照片[2],B:扫描电镜照片[2]

1.1.3生化特征

布氏弓形菌不分解糖类,不产H2S,马尿酸钠水解试验和脲酶试验阴性,醋酸吲哚酚水解试验、硝酸盐还原、氧化酶和触酶试验均阳性,且该菌对萘啶酸敏感[1]

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

布氏弓形菌传播的主要来源包括摄入受污染的水、食物污染和牛等牲畜的粪便;未煮熟或最低限度加工的食物在感染传播中也构成高风险。该菌可通过口腔进入消化道导致人患肠胃炎等疾病,因此可能对公众健康造成严重危害[1]

1.2.2致病性

布氏弓形菌的致病性与其粘附、侵袭和细胞毒性能力有关,该菌毒力基因包括cadFcj1349ciaBmviNhecAhecB等。基因cadFcj1349编码纤连蛋白结合蛋白,增强细菌对宿主细胞的附着;ciaB参与宿主细胞侵袭;mviN编码蛋白MViN,这对肽聚糖的生物合成至关重要;hecA基因编码HecA蛋白(Rojas),而hecB编码溶血素活化蛋白[3]

一些研究显示,布氏弓形菌对阿莫西林、萘啶酸、庆大霉素、克林霉素、阿奇霉素、环丙沙星、甲硝唑、羧苄西林和头孢哌酮等都具有抗药性,但对氟喹诺酮类药物和四环素的敏感性最大,因此,这两种抗生素可用于治疗布氏弓形菌引起的感染[4]

1.3检测方法

(1)传统方法:取25 g一般样品与225 mL JM肉汤均质过滤,在30℃微需氧条件下增菌44小时。接着将增菌液划线接种于JM琼脂和弓形菌琼脂平板,30℃微需氧培养24-48小时后,挑取直径1-2 mm的可疑菌落(JM琼脂上呈灰色至白色,弓形菌琼脂上呈半透明浅黄色)至布氏琼脂平板纯化。对纯化后的可疑菌落进行鉴定,鉴定项目包括显微观察、氧化酶试验、三糖铁生长试验、微需氧条件下25℃生长试验、Hugh-Leifson培养基穿刺生长、马尿酸钠水解试验、吲哚乙酸酯水解试验、头孢金素敏感性试验。待所有试验项目完成,综合各指标的检测结果,最终给出布氏弓形菌的检出报告[5]

(2)分子生物学方法:称取25 g动物源性食品样品,加入225 mL JM肉汤中均质2分钟。将均质液置于30℃恒温培养箱中,微需氧条件下增菌培养48小时。取1 mL增菌液,使用DNA提取试剂盒提取基因组DNA作为模板。配置50 μLPCR反应体系,包含1.5 mmol/L MgCl₂、上下游引物各50 pmol、5 μL 10×PCR缓冲液、1.5 UTaq聚合酶、各0.2 mmol/L的dNTPs及2 μL模板DNA。将反应管置于PCR仪中,按以下程序扩增:94℃预变性5分钟;然后进行30个循环(94℃变性45秒,58℃退火45秒,72℃延伸2分钟);最后72℃终延伸10分钟。每次实验需设置阳性、阴性及空白对照。取10 μL扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察2061 bp处是否出现特异性条带以判断结果[6]

表1 引物信息

引物名称 引物序列(5´→3´)
F GCTAGAGGAAGAGAAATCAA
R TCCTGATACAAGATAATTGTACG

1.4典型案例

Tyagi[7]等人对世界上最大的污水养鱼场,东加尔各答湿地(EKW)中细菌群落的结构进行分析,测序数据显示,该渔场中弓形菌属丰度最高可达50%,此外,还对污水进行了相关指标检测,证明了未经处理的水或污水环境是弓形菌属的主要生活地。

1.5防治对策

切断传播途径非常重要,水可以作为弓形菌重要的传播媒介,在由弓形菌感染所致的腹泻中被污染的饮用水是重要的危险因子。因此,做好粪便无害化处理,防止病菌污染水源。若已经感染该菌,可用氟喹诺酮类药物和四环素进行治疗[4]

参考文献

[1] 赵虎. 厌氧菌和微需氧菌感染与实验诊断. 上海: 上海科学技术出版社, 2005.

[2] Fernandez H, Jaramillo A. Microbiological portrait Arcobacter butzleri. Revista Chilena de Infectologia: Organo Oficial de la Sociedad Chilena de Infectologia, 2016, 33: 663-664.

[3] Khan IUH, Chen W, Cloutier M et al. Pathogenicity assessment of Arcobacter butzleri isolated from Canadian agricultural surface water. BMC Microbiol, 2024, 24: 17.

[4] Chieffi D, Fanelli F, Fusco V. Arcobacter butzleri: Up‐to‐date taxonomy, ecology, and pathogenicity of an emerging pathogen. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety, 2020, 19: 2071-2109.

[5] 国家质量监督检验检疫总局. 出口食品中弓形菌的检测方法(SN/T 3624-2013). 2013.

[6] 游淑珠, 王小玉, 胡松楠 等. PCR法检测动物源性食品中布氏弓形菌. 现代食品科技, 2013, 29: 2533-2537.

[7] Tyagi I, Tyagi K, Bhutiani R et al. Bacterial diversity assessment of world’s largest sewage-fed fish farms with special reference to water quality: a Ramsar site. Environmental Science and Pollution Research, 2021, 28: 42372-42386.

文章目录