**醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）**

物种名：醋酸钙不动杆菌

拉丁学名：Acinetobacter calcoaceticus

分类学地位：细菌界Bacteria；假单胞菌门Pseudomonadota；

γ-变形菌纲Gammaproteobacteria；莫拉菌目Moraxellales；

莫拉菌科Moraxellaceae；不动杆菌属Acinetobacter

醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）主要存在于水体和土壤中，易在潮湿环境中生存，也存在于健康人的皮肤、呼吸道、泌尿生殖道，为条件致病菌。感染本菌易导致脑膜炎、中耳炎、败血症和泌尿生殖系感染等疾病。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

醋酸钙不动杆菌为需氧菌，最适生长温度35℃，无特殊营养要求，普通培养基生长良好。在血琼脂平板上经18-24小时培养后，可见圆形、凸起、灰白色、光滑、边缘整齐的菌落，并且醋酸钙不动杆菌的菌落相较于不动杆菌属的其他种会较大（图1）^[1]。

图1 醋酸钙不动杆菌在血平板上的培养结果^[2]

1.1.2形态学特征

本菌为革兰阴性菌，但因为革兰氏染色不易脱色，很容易呈假阳性。菌体呈球状或球杆状，单个或成双排列，偶尔呈丝状或链状，常似奈瑟氏菌，无鞭毛，无芽孢^[1]。

图2 醋酸钙不动杆菌显微照片

A：革兰氏染色照片^[3]，B：扫描电镜照片^[4]

1.1.3生化特征

醋酸钙不动杆菌可氧化葡萄糖和乳糖，但不氧化木糖；本菌精氨酸双水解酶、鸟氨酸脱羧酶、苯丙氨酸脱氨酶均阳性；不液化明胶，丙二酸盐利用试验、柠檬酸盐利用试验阳性^[1]。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

醋酸钙不动杆菌属于不动杆菌属，广泛分布于自然界中，主要存在于水体与土壤中，且易在潮湿环境中生存^[1]。

1.2.2致病性

近年来，不动杆菌属在非发酵菌中其感染率仅次于铜绿假单胞菌而占第二位，本菌是医源性感染脑膜炎、中耳炎、败血症和泌尿生殖系感染的主要病原菌^[1]。

近些年来随着大量激素和广谱抗菌药物在临床的广泛使用，导致不动杆菌的分离率越来越高，特别是醋酸钙不动菌，该菌耐药现象严重，对诺氟沙星、哌拉西林、环丙沙星、头孢曲松、头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星的耐药性均高于70%，对临床治疗和预防本菌的感染造成了很大困难。但本菌对多粘菌素B、美满霉素、舒巴坦与β内酰胺类敏感性较好，可用其进行治疗^[5]。

1.3检测方法

（1）传统方法：按要求处理样品，确保样品的代表性和均一性，去除杂质等干扰物质。样品制备后接种至营养肉汤培养基增菌培养，取增菌液划线接种至异养硝化固体培养基或好氧反硝化固体培养基培养，挑取典型可疑菌落（乳白色、不透明、表面光滑、边缘平整）进行革兰染色，观察结果，并进一步通过氧化酶、接触酶、葡萄糖利用等生理生化试验及血清学凝集试验完成鉴定^[6]。

（2）分子生物学检测方法：Higgins等^[7]在既有gyrB多重PCR基础上扩展了醋酸钙不动杆菌和Acinetobacter genomic species 3的种水平鉴定方法。研究共纳入146株临床株、模式株和参考株，其中包括23株醋酸钙不动杆菌、36株Acinetobacter genomic species 3、21株鲍曼不动杆菌、29株GS13TU以及多种其他不动杆菌。模板DNA可采用DNeasy试剂盒提取，也可将菌落悬于PCR级水中煮沸10 min后作为模板。研究首先使用D14/gyrB-2扩增并测序gyrB片段，在序列比对基础上筛选物种特异性引物；随后采用D14/D19作为醋酸钙不动杆菌特异性引物，反应体系中各引物终浓度为0.2 μM。PCR程序为94℃预变性2 min，随后30个循环（94℃ 1 min、56℃ 30 s、72℃ 1 min），最后72℃延伸10 min。醋酸钙不动杆菌可产生428 bp特异性扩增片段，而其他受试不动杆菌种不产生该特异条带；必要时还可用D14/gyrB-2重新扩增并测序gyrB片段进行确认。研究所用醋酸钙不动杆菌鉴定引物序列见表1。该方法可在约2.5 h内完成，较测序法更简便、成本更低，并在研究所纳入的多种不动杆菌中表现出良好的物种区分能力。

表1 PCR引物序列^[7]

引物	序列（5´→3´）
D14	GACAACAGTTATAGGTTTCAGGTG
D19	CCGCTATCTGTTACCGCAGTA
gyrB-2	CTTACGAGGGCTCATTTCAC

1.4典型案例

Bifulco等^[8]对美国西弗吉尼亚州普雷斯顿县未经处理的农村个体地下水供水系统进行了细菌学调查。研究采用培养计数和生理生化鉴定等方法评价供水微生物污染情况，结果显示约60%的供水系统总大肠菌群超过当时美国环境保护署规定的1 CFU/100 mL限值，约三分之一检出粪大肠菌群和/或粪链球菌。不动杆菌属在38%的地下水供水系统中检出，算术平均密度为8 CFU/100 mL；即使在未检出总大肠菌群的供水系统中，仍有16%检出不动杆菌。研究还比较了井水分离株与临床分离株的黏液产生能力，二者无显著差异，提示部分地下水来源菌株具有一定机会致病潜力。

1.5防治对策

醋酸钙不动杆菌易通过进入人体消化道、呼吸道等危害人的健康，也容易通过污染医疗器具而引起医源性感染，所以在日常生活中要注意卫生安全，医院有严格遵守无菌操作。若感染本菌，治疗可用多粘菌素B和美满霉素等。

参考文献

[1] 夏飞, 梁利国, 顾伟等. 异育银鲫(Carassius auratus gibelio)源醋酸钙不动杆菌表型及分子鉴定. 海洋与湖沼, 2013, 44: 802-806.

[2] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=12373.

[3] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=1260.

[4] Microbe Wiki. https://microbewiki.kenyon.edu/index.php/File:Acinetobactercalcoaceticus.png.

[5] 袁文清. 417株醋酸钙不动杆菌的临床分布及耐药性研究. 中国实用医药, 2013, 8: 154-155.

[6] 张泽锟, 闫勇, 郭静等. 异养硝化-好氧反硝化菌株的分离、鉴定及其氨氮降解过程初探. 中国酿造, 2022, 41: 83-88.

[7] Higgins P G, Lehmann M, Wisplinghoff H et al. gyrB multiplex PCR to differentiate between Acinetobacter calcoaceticus and Acinetobacter genomic species 3. Journal of Clinical Microbiology, 2010, 48: 4592-4594.

[8] Bifulco JM, Shirey JJ, Bissonnette GK. Detection of Acinetobacter spp. in rural drinking water supplies. Applied And Environmental Microbiology, 1989, 55: 2214-2219.