温和气单胞菌(Aeromonas sobria)

物种名:温和气单胞菌

拉丁学名:Aeromonas sobria

分类学地位:细菌界Bacteria;假单胞菌门Pseudomonadota;

γ-变形菌纲Gammaproteobacteria;气单胞菌目Aeromonadales;

气单胞菌科Aeromonadaceae;气单胞菌属Aeromonas

温和气单胞菌(Aeromonas sobria)广泛存在于自然环境中,是一种人-兽-鱼共患的条件致病菌,对于人的健康有着很大的影响,其可导致人食物中毒、腹泻等疾病,也可导致多种水生动物染病,生物安全等级为二级。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

温和气单胞菌在普通营养琼脂培养基上长势很好,形成圆形、中间隆起、半透明、边缘整齐的菌落。在麦康凯琼脂平板上生长良好,菌落圆形、扁平、湿润、较混浊,少数菌落呈淡粉红色。可以在一般的血琼脂平板上形成溶血环,例如在兔血琼脂平板上形成β-溶血环[1]。

1.1.2形态学特征

温和气单胞菌是两端钝圆、有运动性、有单鞭毛、没有荚膜和芽孢的革兰氏阴性短直杆菌,一般是单个或一对存在,菌体大小在(0.3-1.0) μm × (1.0-3.5) μm左右。同时,该菌是兼性厌氧菌,对于环境有很强的适应能力,适宜生长的pH范围为5.5-9.0,适宜生长的温度范围为25-30℃[2]。

图1 温和气单胞菌扫描电镜图像[3]

1.1.3生化特征

温和气单胞菌的甘露醇、麦芽糖、D-葡萄糖产酸、赖氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶、蔗糖、明胶水解、M.R反应均呈阳性;鸟氨酸脱羧酶、丙二酸、硫化氢、柠檬酸盐、纤维二糖、V-P实验、氰化钾则为阴性[4]。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

该菌广泛存在于自然环境中,在淡水、土壤、粪便以及污水等中普遍存在,通过接触或饮用被污染的水,可能导致感染。对水生动物、人类以及畜禽类都有一定的致病性,能导致多种疾病的发生,是一种人-兽-鱼共患的条件致病菌[5, 6]。同时,食用被温和气单胞菌污染的食物,尤其是生的或未煮熟的海鲜、肉类及乳制品等也会造成食物中毒事件。

1.2.2致病性

温和气单胞菌的致病范围非常广泛,目前已知该菌能导致很多水生动物患上不同的疾病,例如感染长丝裂腹鱼、日本鳗鲡、中华鳖、尼罗罗非鱼、牛蛙等,会引起皮肤溃疡、爆发性败血症、腹水病等疾病。同时有大量报道明确表明温和气单胞菌会导致人患病,感染患者临床症状为:发烧、腹痛、腹泻、呕吐,大便多数为水样便,少数脓血便。除此以外,还会导致人患细菌性脑膜炎、宫颈糜烂、心内膜炎、关节炎等疾病[2]。

温和气单胞菌的致病过程极其复杂,由多种毒力因子协同作用导致。温和气单胞菌的致病性是多因素的,涉及蛋白酶、溶血素、肠毒素和表层蛋白层等多种毒力因子。其中,气溶素是其关键毒力因子:对红细胞具有溶血活性、对Vero细胞具有细胞毒性、并在乳鼠试验中表现出肠致泻性[7]。

1.3检测方法

  1. 传统方法:将分离得到的菌株接种于培养基平板中,观察菌落形态及溶血性。测定麦芽糖、甘露醇、吲哚等17项生理生化指标,结果参考《常见细菌系统鉴定手册》[8]。

(2)分子生物学方法:黄冠军等人[9]基于温和气单胞菌丝氨酸蛋白酶(ASP)基因的保守序列设计特异性引物(表1),最终筛选出引物对AS3F/AS3R,可扩增出131 bp的目标片段。PCR反应程序为:95℃预变性4 min,随后38个循环(94℃ 15 s→56℃ 10 s→72℃ 15 s),最后72℃延伸5 min。该体系对靶标DNA的检测灵敏度为1.0 pg/20 μL,对活菌的检测下限为50 CFU/20 μL,且与柱状黄杆菌、河弧菌等非靶标菌无交叉反应,特异性良好。

表1 温和气单胞菌PCR引物序列[9]

名称 序列(5’→3’)
AS3F GCAATCTAGCCATCCAAACG
AS3R CCAACGTAAGTACAGCTATGC

1.4典型案例

2010年7月,中国河南省新密市刘寨镇某村因连降暴雨导致水源水(自备水井、水塔水及管网末梢水)受温和气单胞菌(Aeromonas sobria)污染(水源地附近存在医疗垃圾和生活垃圾、上游鱼塘使用鸡粪养鱼并向河内排水),造成该村沟北组122名饮用该水源的村民中52人罹患感染性腹泻(罹患率42.6%),临床主要表现为腹痛、腹泻、恶心、呕吐等。检测方法包括水样及粪便标本的增菌分离培养、生化鉴定及血清学确认。处置措施包括停用污染水源并用水车运送清洁饮用水、清理家庭贮水及环境杂草垃圾、对厕所及猪圈等场所开展消杀灭蚊蝇、开展健康宣教等;疫情在采取控制措施后14 d内得到控制,所有患者痊愈,无死亡病例[10]。

1.5防治对策

预防温和气单胞菌感染需多维度协同:日常注重个人卫生,勤用肥皂洗手,无洗手条件时使用手消毒剂;安全处理食物,避免生食或食用未煮熟的海鲜等潜在污染食物,规范食物储存与烹饪;规避污染水源,接触泳池、河流等水域时避免吞咽污水;做好伤口护理,及时用肥皂和水清洁伤口,出现感染迹象立即就医;合理使用抗生素,严格遵循医嘱用药并完成完整疗程;临床等场所强化环境管控,落实卫生清洁措施,降低医源性感染风险。通过个人卫生、饮食安全、水源防护、医疗规范等综合手段,可有效预防温和气单胞菌感染及传播。

参考文献

[1] 赵安敏, 高鹏, 赵刚 等. 温和气单胞菌的调查和鉴定. 疾病监测, 1994, 9: 12-13+16.

[2] 张山. 鲫鱼温和气单胞菌的分离鉴定与生物学特性分析. 安徽农业大学, 2020.

[3] Xin J Y ,Fang Y Q ,Qing W L et al. Evaluation of Antibacterial and Antibiofilm Properties of Kojic Acid against Aeromonas sobria and Staphylococcus saprophyticus. Journal of Food Quality, 2023, 2023: 2531438..

[4] 彭小倩, 任朝颖, 邓雪玥 等. 杂交鲟源温和气单胞菌的分离鉴定及生物学特性的研究. 淡水渔业, 2023, 53: 62-70.

[5] 钟有光. 气单胞菌及其感染流行状况. 医学信息旬刊, 2011, 24: 1233-1234.

[6] 吕爱军, 李槿年, 余为一. 嗜温气单胞菌研究进展. 中国动物检疫, 2000: 42-43.

[7] Zhu D, Li A, Wang J et al Cloning, expression and characterization of aerolysin from Aeromonas hydrophila in Escherichia coli. Indian Journal of Biochemistry & Biophysics. 2007, 44: 204-208.

[8] 东秀珠, 蔡妙英 等. 常见细菌系统鉴定手册. 北京: 科学出版社, 2001.

[9] 黄冠军, 刘天强, 刘衍鹏 等. 温和气单胞菌PCR快速诊断方法的建立. 淡水渔业, 2012: 89-92.

[10] 乔国平, 钱建华. 温和气单胞菌引起感染性腹泻暴发调查分析. 河南预防医学杂志, 2016, 27: 510-512.

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