创口鲍特菌（Bordetella trematum）
物种名：创口鲍特菌
拉丁学名：Bordetella trematum
分类学地位：细菌界Bacteria；假单胞菌门Pseudomonadota；
β-变形菌纲Betaproteobacteria；伯克霍尔德菌目Burkholderiales；
产碱杆菌科Alcaligenaceae；鲍特菌属Bordetella
创口鲍特菌（Bordetella trematum）属于鲍特菌属，是一种革兰阴性短小杆菌。创口鲍特菌于1996年首次被报道，是一种少见的人体条件致病菌。其主要分离自慢性创面、糖尿病足、烧伤及软组织感染标本，近年来随着MALDI-TOF MS和全基因组测序的发展，其检出率逐渐增加。
1.1生物学特性
1.1.1培养特征
创口鲍特菌为专性需氧菌，营养要求不高，在普通营养琼脂平板上生长良好。培养24 h后，观察发现血琼脂培养基上有圆形、干燥、粗糙大小不等的乳白色菌落，在麦康凯培养基上有淡粉红色、点状、干燥、针尖样大小的菌落。继续培养至48 h后观察发现血平板上的菌落呈扁平、干燥、表面粗糙、不规则、较大的乳白色菌落，在麦康凯培养基上长成较小的淡粉红色、圆形菌落[1]。
图1创口鲍特菌血平板和麦康凯培养基上培养的菌落形态[1]
注：A、B为培养24 h后菌落形态，C、D为培养48 h后菌落形态
1.1.2形态学特征
创口鲍特菌为革兰阴性短杆菌，大小约0.5-1.5 μm，无芽孢，无荚膜，不形成芽孢，宽0.5pm、长1.0-1.8 μm的杆状菌，但也曾观察到2.4 μm长的菌体。其最适生长温度为35-37℃，在25-42℃的温度范围内需氧生长，但在最适宜温度下可在微氧环境中生长[2]。
1.1.3生化特征
不利用葡萄糖作为营养源，具有运动性，硝酸盐还原能力不一，过氧化氢酶和柠檬酸盐试验呈阳性，脲酶、氧化酶和赖氨酸脱羧酶试验呈阴性[3]。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1分布与传播
创口鲍特菌是一种罕见的革兰阴性球杆菌，报道较少；其感染常与糖尿病等基础疾病及下肢溃疡、创面相关，患者多因坏死性溃疡、坏疽入院，溃烂创面可被该菌感染，常与其他细菌混合感染。在本病例中，患者患有糖尿病、高血压等基础疾病，术中创面组织样本培养出该菌[4]。
1.2.2致病性
创口鲍特菌属于条件致病菌，可形成生物膜并长期定植于慢性创面。部分菌株能够产生脂多糖、外膜蛋白及黏附因子，引起持续性炎症反应。严重病例可发展为菌血症、败血症及感染性休克，尤其在免疫抑制患者中病死率较高。创口鲍特菌主要引起创面皮肤和软组织感染，也有报道从患者下呼吸道、耳分泌物和血液中分离到此菌。若治疗不及时，可引起严重的血流感染，导致脓毒血症，威胁患者生命[5]。
图2 创口鲍特菌阳性溃疡的临床表现[5]
1.3检测方法
（1）培养鉴定法：普通血琼脂培养24-48 h后形成灰白色菌落，结合革兰染色及生化试验进行初步鉴定。
（2）药敏试验：采用最低抑菌浓度（MIC）法进行药物敏感性检测。制备0.5麦氏单位菌悬液，根据革兰阴性菌药敏卡（GN09）要求进行稀释，然后使用VITEK 2 Compact仪器进行药敏试验[6]。试验结果根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）M100抗菌药物敏感性试验执行标准2020版进行判读[1, 3]。
（3）16S rRNA基因PCR-测序法：高松等[1]从患者创面分泌物中分离获得可疑鲍特菌属菌株，并采用16S rRNA基因PCR扩增结合测序进行种水平确认。研究使用细菌基因组DNA作为模板，采用16S rRNA通用正向引物AGAGTTTGATCCTGGCTCAG和反向引物ACGGCTACCTTGTTACGACTT进行扩增，所用引物序列见表1。PCR程序为94℃预变性5 min；94℃变性30 s、56℃退火30 s、72℃延伸1 min，共30个循环；最后72℃延伸10 min。琼脂糖凝胶电泳显示获得约1 500 bp的特异扩增产物，扩增产物经测序后进行NCBI BLAST比对，与Bordetella trematum参考序列的同源性为99.9%，从而确认分离株为创口鲍特菌。该研究中VITEK 2 Compact仅鉴定到鲍特菌属（置信度97%），而VITEK MS及16S rRNA分析均将菌株鉴定为创口鲍特菌（置信度/序列同源性均为99.9%），说明PCR-测序可作为少见或生化反应不典型菌株的可靠确认手段。
表1 创口鲍特菌16S rRNA基因PCR鉴定引物序列[1]
| 引物名称 | 序列（5′-3’） |
| F | AGAGTTTGATCCTGGCTCAG |
| R | ACGGCTACCTTGTTACGACTT |
1.4典型案例
2021年法国图尔大学医院报道1例由Bordetella trematum引起的右臂丹毒并菌血症[7]。患者为88岁免疫功能受损男性，入院时高热并出现右臂红斑和水肿。血培养在常规培养基上生长出革兰阴性球杆菌，经MALDI-TOF MS鉴定为创口鲍特菌，并由16S rRNA基因测序进一步确认。根据药敏结果和肾功能，治疗调整为头孢他啶静脉用药10 d，患者临床和实验室指标迅速改善，6个月随访未见感染复发。
Marathe等[8]于2007年3月对印度海得拉巴Patancheru Environment Technology Limited（PETL）工业污水处理厂进行采样。该厂接收多家原料药生产企业排放的废水，水体长期承受较高浓度抗菌药物的选择压力。研究在均衡池、两级曝气池、沉淀池以及不同污泥阶段采集样品，采用平板培养分离、16S rRNA基因PCR/测序鉴定并开展药敏试验。在93株分离菌中，研究从沉淀池样品分离并鉴定出2株Bordetella trematum（SR-6和SR-13）；在39种受试抗菌药物中，两株分别对15种和14种表现耐药，另分别对1种和3种表现中介。该研究属于工业污染污水处理中直接分离创口鲍特菌的环境证据，同时提示抗菌药物污染污水可能形成耐药菌及耐药基因富集环境。
1.5防治对策
（1）加强糖尿病足及慢性创面的规范护理。
（2）及时清创，减少生物膜形成。
（3）依据药敏试验对利福平和克拉霉素具有抗药性[5]，合理选择哌拉西林/他唑巴坦、碳青霉烯类等敏感抗菌药物。
（4）采用MALDI-TOF MS或分子检测技术提高鉴定准确率。
（5）加强医院感染监测及耐药菌株监测。
参考文献
[1] 高松, 陈安林, 黄健,等. 首次从人创面分泌物中分离出创口鲍特菌及病例简报. 中国感染控制杂志, 2022, 21: 494-498.
[2] 庄辉. 中华医学百科全书 基础医学医学微生物学 1. 北京: 中国协和医科大学出版社, 2024.
[3] Castro TR, Martins RCR, Dal Forno NLF et al. Bordetella trematum infection: case report and review of previous cases. BMC Infectious Diseases, 2019, 19: 485.
[4] y Castro, Thaís Regina thais.y.c, Martins et al. Bordetella trematum infection: case report and review of previous cases. BMC Infectious Diseases, 2019, Vol.19: 485.
[5] Tchan BGO, Kakou-Ngazoa S, Dizoe S et al. Mycobacterium ulcerans–Bordetella trematum chronic tropical cutaneous ulcer: A four-case series, Côte d’Ivoire. PLOS Neglected Tropical Diseases, 2023, 17: e0011413.
[6] Buechler C, Neidhofer C, Hornung T et al. Detection and Characterization of Clinical Bordetella trematum Isolates from Chronic Wounds. Pathogens, 2021, 10: 966.
[7] Lacasse M, Inyambo K, Lemaignen A et al. Erysipelas of the right arm due to Bordetella trematum: a case report. Journal of Medical Case Reports, 2021, 15: 365.
[8] Marathe NP, Regina VR, Walujkar SA et al. A Treatment Plant Receiving Waste Water from Multiple Bulk Drug Manufacturers Is a Reservoir for Highly Multi-Drug Resistant Integron-Bearing Bacteria. PLOS ONE, 2013, 8: e77310.