埃可病毒（Echovirus）
物种名：埃可病毒
拉丁学名：Echovirus
分类学地位：病毒界Viruses；正核糖病毒门Orthornavirae；
小核糖病毒纲Pisuviricota；微小核糖病毒目Pisoniviricetes；
微小核糖病毒科Picornaviridae；肠道病毒属Enterovirus
埃可病毒是1951年在脊髓灰质炎流行期间偶从健康儿童的粪便中分离到的。由于当时不知它与人类何种疾病相关，故称其为孤儿病毒，后称为人类肠道致细胞病变孤儿病毒（Enteric cytopathic human orphanvirus, ECHO），即埃可病毒。
1.1生物学特性
1.1.1培养特征
埃可病毒的细胞培养特性与脊髓灰质炎病毒相似，对猴肾和人胚肾细胞敏感[1]。
1.1.2形态学特征
病毒呈球形，病毒大小为24-30 nm，二十面体立体对称球形，无包膜，衣壳由60个蛋白质亚单位或原粒构成（图1）[1]。
图1 埃可病毒病毒在扫描电镜下照片[3]
1.1.3生化特征
埃可病毒对酸抵抗力较其他小RNA病毒强，可抵抗pH值为3.0的环境，但对热敏感，50℃迅速被灭活。紫外线和干燥也能使其灭活。0.3%甲醛或0.3-0.5 ppm游离氯可使其迅速灭活[2]。
1.1.4分子生物学特征
埃可病毒是无包膜的小单链正链RNA病毒。埃可病毒的基因组长约7400个核苷酸，包含一个长开放阅读框（ORF），两侧是5′-和3′-非翻译区（UTR）。ORF被翻译成多蛋白，然后被切割成前体蛋白P1、P2和P3。P1进一步裂解成结构蛋白VP1-VP4；P2和P3被加工成六种非结构蛋白。VP1-VP4蛋白是主要的结构衣壳蛋白，由于VP1含有重要的抗原位点，因此对不同血清型具有很高的特异性。因此，可根据VP1编码序列进行血清型分类[4]。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1分布与传播
埃可病毒的传播途径以接触、呼吸道和消化道传播为主，带病毒的粪便可通过污染水源，然后经手、餐具、食物等途径进入人体内，亦可存在于健康的咽喉和肠道内。该病毒感染遍布全世界，夏秋季发病较多，病人以儿童为主，无症状带病毒者是主要传染源[5]。
1.2.2致病性
埃可病毒有31个血清型，即1-9型、11-27型及29-33型（10型归呼肠病毒、28型归鼻病毒、34型归柯萨奇病毒）[6]。不同型埃可病毒感染引起不同的症状，故本病毒感染的症状多种多样，其中以中枢神经系统感染最多，曾引起数次爆发流行，其症状与柯萨奇病毒感染无异，病程7-10天，成人的疲乏感和脑膜刺激征可持续数周到数月。
埃可病毒经口进入消化道后，在咽和肠道淋巴组织中初步增殖，而后进入血液并扩散到全身，最后进入靶器官如脊髓、脑、脑膜、心肌、皮肤等可引起无菌性脑膜炎、脑炎、共济失调、出疹、腹泻、肝功能紊乱，甚至危及生命[1]。常导致无菌性脑膜炎和轻瘫、疱疹性咽峡炎、手足口病、流行性胸痛、心肌炎、心包炎和斑丘疹等症状（图2）。
图2 感染埃可病毒的斑丘疹[7]
1.3检测方法
（1）传统方法：病程早期采集粪便、直肠拭子或咽拭子；无菌性脑膜炎患者采集脑脊液；其他患者可根据其症状采集水疱液、尿液、结膜拭子等进行分离培养，用原代或传代猴肾细胞或人源细胞分离培养病毒，根据出现CPE情况收集病毒液。然后用中和试验、HI试验、CF试验等进行鉴定[6]。
（2）分子生物学方法：邱晓枫等[8]建立了针对埃可病毒9型（ECHO-9）的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法。研究根据GenBank中ECHO-9 VP1基因序列进行比对，在保守区设计特异性引物与TaqMan探针（见表1），并对反应条件、特异性、灵敏度和重复性进行验证。该方法与EV71、CA16、CA24v、CA6、CA10及埃可病毒30型等其他肠道病毒均无交叉反应，最低检测灵敏度可达0.1 TCID₅₀/mL，重复性良好；从粪便等疑似病例标本中可直接检测病毒核酸，检测全程约3~4 h。研究表明，该方法具有较好的特异性、灵敏度和快速性，适用于埃可病毒9型的临床早期诊断与疫情监测。除实时荧光定量RT-PCR外，埃可病毒还可采用常规RT-PCR结合VP1区测序进行分型，也可通过宏基因组测序等方法开展病原鉴定和分子流行病学分析。
表1产气荚膜梭菌TaqMan实时荧光定量PCR检测的引物与探针序列[8]
| 名称 | 序列（5′→3′） |
| F | CCAARTAATGTACATACCACC |
| R | TTCGGTCCAAAATATGCT |
| 探针 | FAM-TCCCTAAGAAGGTGGATGGYTAT-BHQ1 |
1.4典型案例
2012年4月16日，江苏省江阴市某学校发生埃可病毒30型相关病毒性脑膜炎暴发。调查共发现103名学生病例，罹患率为4.6%（103/2255），主要表现为发热、头晕、头痛、恶心和呕吐。流行病学调查显示，饮用校内温开水和未煮沸饮水与发病显著相关，提示饮用水暴露为主要危险因素。对27名学生的咽拭子和直肠拭子采用RT-PCR检测，其中22份肠道病毒阳性；进一步分型的9名学生中有7名检出埃可病毒30型。调查后通过停止相关饮水暴露、加强饮水卫生管理及病例监测等措施控制疫情[9]。
2012年广东省罗定市发生无菌性脑膜炎暴发，埃可病毒30型为主要病原。持续环境监测显示，2010—2012年广州城市污水中已可检出埃可病毒30型；暴发后采集的罗定市污水样品中有6/43（14.0%）检出该病毒。研究采用病毒分离、RT-PCR及VP1基因测序进行环境与临床毒株比较，结果显示广州、罗定污水分离株与暴发病例临床株核苷酸序列相似性达98.5%~100%，并具有相近的系统发育聚类特征，提示当地污水中的持续环境监测可用于追踪埃可病毒30型的传播及暴发来源[10]。
1.5防治对策
预防埃可病毒感染，应注意饮食卫生。婴幼儿的奶瓶、水瓶注意消毒。母亲哺乳时，注意洗手等。另外，病人应注意隔离，尤其不让儿童接触病人[6]。
参考文献
[1] Kopecka H. Echoviruses (Picornaviridae). In: Granoff A, Webster RG, Eds. Encyclopedia of Virology. 2nd ed. Elsevier, 1999: 411-417.
[2] Johannessen I, Burns SM. Picornaviruses. In: Greenwood D, Barer M, Slack R, Irving W, Eds. Medical Microbiology. 18th ed. Churchill Livingstone, 2012: 483-496.
[3] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=16525.
[4] Wang Y, Shah PT, Liu Y et al. Genetic Characteristics and Phylogeographic Dynamics of Echovirus. Journal of Microbiology, 2023, 61: 865-877.
[5] Public Health Agency of Canada. Pathogen Safety Data Sheets: Infectious Substances – Echovirus.https://www.canada.ca/en/public-health/services/laboratory-biosafety-biosecurity/pathogen-safety-data-sheets-risk-assessment/echovirus-pathogen-safety-data-sheet.html.
[6] Oberste MS, Gerber SI. Enteroviruses and parechoviruses: echoviruses, coxsackieviruses, and others. Springer, 2014: 225-252.
[7] Public Health Image Library (PHIL). https://phil.cdc.gov/Details.aspx?pid=4482.
[8] 邱晓枫, 张国忠, 黄志成 等. 埃可病毒9型荧光RT-PCR快速检测方法的建立及应用. 病毒学报, 2017, 33: 836-841.
[9] 陆向东, 崔亮亮, 马焰 等. 一起饮水污染导致埃可病毒30型脑膜炎暴发的调查. 中华流行病学杂志, 2012, 33: 1067-1071.
[10] Zheng H, Lu J, Zhang Y et al. Elucidation of echovirus 30’s origin and transmission during the 2012 aseptic meningitis outbreak in Guangdong, China, through continuing environmental surveillance. Applied and Environmental Microbiology, 2015, 81: 2311-2319.