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1.弗尼斯弧菌(Vibrio furnissii

物种名:弗尼斯弧菌

拉丁学名:Vibrio furnissii

分类学地位:细菌界Bacteria;变形菌门Proteobacteria; γ-变形菌纲Gamma proteobacteria;弧菌目Vibrionales;

弧菌科Vibrionaceae;弧菌属Vibrio

弗尼斯弧菌(Vibrio furnissii)天然存在于江、河、湖、海及含盐水域中,可引起鱼类或虾类疾病,人通过饮水或进食水产品而致病。本菌是近年来国内外学者公认的新食源性致病菌,对全球公共卫生和食品安全造成潜在威胁。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

弗尼斯弧菌可用TCBS和麦康凯琼脂平板来进行分离,本菌在TCBS平板上35℃培养24小时菌落呈现黄色、圆形隆起(图1);在麦康凯平板上为无色、透明、原型小菌落。本菌可产生溶血素,因而在血平板上呈β-溶血,形成宽大、界限分明、完全透明的溶血环[1]

图 1弗尼斯弧菌在TCBS琼脂平板上生长情况[2]

1.1.2形态学特征

本菌为革兰氏染色阴性菌(图2),浚图呈稍弯或短杆菌,大小为0.2μm×0.5μm。本菌有动力,有长于菌体几倍的鞘生极端鞭毛和较细的侧生波状鞭毛[1]

图2弗尼斯弧菌显微照片[3]

1.1.3生化特征

弗尼斯弧菌可发酵葡萄糖、甘露糖、蔗糖和阿拉伯糖产气,不发酵鼠李糖;本菌MR试验、动力实验、L-精氨酸均阳性;V-P试验、三糖铁琼脂(H2S)、水杨酸、七叶苷KCN 中的生长等均阴性[1]

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

本菌广泛分布世界各地,特别是江、河、港湾水域,主要传播媒介为海水及海产品,如虾、鱼、文蛤等。人通过饮水或进食水产品而致病,发病季节常在水温升高时期的夏季。

1.2.2致病性

弗尼斯弧菌存在于海洋,人类因摄入被污染的水、食物而感染,主要引起急性胃肠道炎症,典型症状是水样便、腹痛、轻到中度脱水、常伴有发热等症状,且会引起浅表创伤感染、菌血症等疾病,为旅游者腹泻的病原菌之一[4]。该菌除了导致人类患病,还可通过黏附和侵入宿主组织,从宿主中摄取大量营养,分泌多种毒素,从而引起欧洲鳗鱼、对虾、文蛤等水产品的弧菌病,给水产养殖业造成威胁。

目前有关弗尼斯弧菌致病性的研究还较少,人们对弗尼斯弧菌及其可能产生的毒素知之甚少,但有研究表明该菌的致病性与溶血素(Hly)有关。溶血素是许多弧菌属物种都能产生的毒素,它可特异性的结合于红细胞上,将哺乳动物体内的红细胞溶解掉,并释放出血红蛋白,抑制红细胞发挥功能。该毒素是能破坏机械性宿主防御、补体和免疫应答的毒力因子[5]

1.3检测方法

  1. 传统方法:通常将可疑样本进行增菌处理后,接种于TCBS或麦康凯琼脂培养基中进行分离纯化,随后进行生化特征试验鉴定。河流弧菌和弗尼斯弧菌皆为精氮酸阳性菌,两者生化特征相似,两者V-P反应结果皆为阴性,主要区别为弗尼斯弧菌可发酵糖类产气。
  2. 分子生物学方法:王殿夫[6]等根据弗尼斯弧菌的toxS基因分别设计了普通 PCR引物和实时荧光 PCR引物、探针,经试验证明这两种方法特异性良好,检测灵敏度分别为2400和24 CFU/mL,2种方法的检测灵敏度分别是传培养方法的10和1000倍。普通PCR引物序列为:VFToxS-F1:5′-CAATCCAAGATGGTCACGCTAA-3’;VFToxS-R1:5′-TTTATCCACCGCGTACAGCTT-3’;

实时荧光PCR引物为:VFToxS-F2:5′-AGACTGGGACGTGAGTGCAAA-3’;VFToxS-R2:5′-CTGCGCAGAAGAGACATCTTTAAA-3’;探针序列:5′-VFToxS-P FAM-TACCTGCTGGTCTCGCCAACCGA-TAMRA-3’。

1.4典型案例

某院于2016年7月17日收治了一名73岁的女性患者,她患有急性肠胃炎约10天,每天稀便发作2-3次,患者无呕吐、腹痛或发热病史。她在腹泻发作前吃过油炸海鱼,经过医院分辨培养检查后确诊感染弗尼斯弧菌,采用多西环素和环丙沙星进行治疗,最后患者痊愈。弗尼斯弧菌存在于海水中,常因污染海产品被人类食用而导致人患病,本案例提示人们在食用海产品时要注意烹饪完全[7]

1.5防治对策

不要生食海产品,烹调海鲜时应充分加热,保证海鲜煮熟后再食用。处理海鲜时应谨防扎伤,可佩戴手套进行处理。避免将裸露的伤口或受损的皮肤暴露在大量贝类生长的环境周围或温热的咸水中。

 

参考文献

[1] 樊景凤, 明红霞, 王斌 等. 中国近海病原生物. 北京: 海洋出版社, 2019.

[2] https://www.tekportal.net/vibrio-furnissii/.

[3] Hashimoto T, Takaya S, Kutsuna S et al. A case report of Vibrio furnissii bacteremia and cellulitis in a malnourished patient without an apparent site of entry. Elsevier, 2018.

[4] Schirmeister F, Wieczorek A, Dieckmann R et al. Evaluation of molecular methods to discriminate the closely related species Vibrio fluvialis and Vibrio furnissii. International Journal of Medical Microbiology, 2014, 304: 851-857.

[5] Wu TK, Wang YK, Chen YC et al. Identification of a Vibrio furnissii Oligopeptide Permease and Characterization of Its In Vitro Hemolytic Activity. Journal of Bacteriology, 2007, 189: 8215.

[6] 王殿夫, 何平, 王青 等. 弗尼斯弧菌PCR检测方法的建立及应用. 中国海洋大学学报(自然科学版), 2018, 48: 10-19.

[7] Ballal M, Shetty V, Bangera SR et al. Vibrio furnissii, an emerging pathogen causing acute gastroenteritis: a Case Report. JMM Case Reports, 2017, 4.

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