1.温和气单胞菌（Aeromonas sobria）
物种名：温和气单胞菌
分类学地位：细菌界Bacteria；变形菌门Proteobacteria；
γ-变形菌纲Gammaproteobacteria；气单胞菌目Aeromonadales；
气单胞菌科Aeromonadaceae；气单胞菌属Aeromonas
温和气单胞菌（Aeromonas sobria）广泛存在于自然环境中，是一种人-兽-鱼共患的条件致病菌，对于人的健康有着很大的影响，其可导致人食物中毒、腹泻等疾病，也可导致多种水生动物染病，生物安全等级为二级。
1.1生物学特性
1.1.1培养特征
温和气单胞菌在普通营养琼脂培养基上长势很好，形成圆形、中间隆起、半透明、边缘整齐的菌落。在麦康凯琼脂平板上生长良好，菌落圆形、扁平、湿润、较混浊，少数菌落呈淡粉红色。可以在一般的血琼脂平板上形成溶血环，例如在兔血琼脂平板上形成β-溶血环[1]。
1.1.2形态学特征
温和气单胞菌是两端钝圆、有运动性、有单鞭毛、没有荚膜和芽孢的革兰氏阴性短直杆菌，一般是单个或一对存在，菌体大小在（0.3-1.0） μm×（1.0-3.5） μm左右。同时，该菌是兼性厌氧菌，对于环境有很强的适应能力，当pH为5.5-9.0是其较适生长范围，适宜生长的温度范围为25-30℃[2]。
图1 温和气单胞菌染色显微照片[3]
1.1.3生化特征
温和气单胞菌的甘露醇、麦芽糖、D-葡萄糖产酸、赖氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶、蔗糖、明胶水解、M.R反应均呈阳性；鸟氨酸脱羧酶、丙二酸、硫化氢、柠檬酸盐、纤维二糖、V-P实验、氰化钾则为阴性[4]。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1分布与传播
该菌广泛存在于自然环境中，在淡水、土壤、粪便以及污水等中普遍存在，通过接触或饮用被污染的水，可能导致感染。对水生动物、人类以及畜禽类都有一定的致病性，能导致多种疾病的发生，是一种人-兽-鱼共患的条件致病菌[5, 6]。同时，食用被温和气单胞菌污染的食物，尤其是生的或未煮熟的海鲜、肉类及乳制品等也会造成食物中毒事件。
1.2.2致病性
温和气单胞菌的致病性非常广泛，目前已知该菌已导致很多水生动物患上不同的疾病，例如感染长丝裂腹鱼、日本鳗鲡、中华鳖、尼罗罗非鱼、牛蛙等，会引起皮肤溃疡、爆发性败血症、腹水病等疾病。同时有大量报道明确表明温和气单胞菌会导致人患病，感染患者临床症状为：发烧、腹痛、腹泻、呕吐，大便多数为水样便，少数脓血便。除此以外，还会导致人患细菌性脑膜炎、宫颈糜烂、心内膜炎、关节炎等疾病[2]。
本菌致病过程极其复杂，由多种毒力因子共同作用导致。其中，致病性温和气单胞菌产生的外毒素包括有溶血素、气溶素、细胞毒性肠毒素等，统称HEC毒素[7]，由单一多肽分子构成，具备溶血性、肠毒性和细胞毒性，且由一个基因家族编码，结构与功能高度相似，其活性依赖蛋白酶激活，同时受温度、渗透压、营养成分等环境因素调控。表层蛋白（S层）作为非特异性黏附结构，通过屏障作用及黏附功能参与致病，还是毒素与蛋白酶释放的关键通道，其构型转化可进一步增强细菌毒力[8]。外膜蛋白（OMP）则通过与宿主细胞受体结合介导黏附，还能形成“外膜蛋白—脂多糖”复合物，影响细菌血凝与黏附过程[9]，是血清学分型及追踪流行株的重要工具。
温和气单胞菌的毒力因子通过协同作用引发致病。细菌首先黏附宿主上皮细胞，经内化繁殖破坏细胞与组织；大量繁殖后释放毒力因子，导致肠道积液、红细胞裂解、毛细血管损伤，进而引发败血症、出血等症状。此外，细胞毒素侵入组织器官，促使细胞溶解、组织崩溃，增加组织渗透性，为细菌扩散提供便利[10]。其毒力强弱不仅存在菌种、菌株差异，还与水温、宿主种类等因素密切相关，通过复杂的作用机制对机体造成多维度损害。
1.3检测方法
- 传统方法：将分离得到的菌株接种于培养基平板中，观察菌落形态及溶血性。测定麦芽糖、甘露醇、吲哚等17项生理生化指标，结果参考《常见细菌系统鉴定手册》。
（2）分子生物学方法：基于温和气单胞菌丝氨酸蛋白酶（ASP）基因的保守序列设计特异性引物，最终筛选出引物对AS3F/AS3R，可扩增出131 bp的目标片段。PCR反应程序为：95℃预变性4 min，随后38个循环（94℃ 15 s→56℃ 10 s→72℃ 15 s），最后72℃延伸5 min。该体系对靶标DNA的检测灵敏度为1.0 pg/20 μL，对活菌的检测下限为50 CFU/20 μL，且与柱状黄杆菌、河弧菌等非靶标菌无交叉反应，特异性良好[11]。
表1 温和气单胞菌PCR引物序列
| 名称 | 序列 |
| AS3F | GCAATCTAGCCATCCAAACG |
| AS3R | CCAACGTAAGTACAGCTATGC |
1.4典型案例
某医院感染科连续收治3例免疫抑制患者，均因发热、伤口感染入院，且均有近期接触Anacostia河污染水源史。实验室从患者血液、伤口分泌物中分离出13株革兰阴性杆菌，经API 20E系统及DNA碱基分析（G+C含量58.7%±0.9%）鉴定为Aeromonas sobria，占临床分离株的86.7%。同期从污染水源采集的9株环境样本中，仅2株为Aeromonas sobria，其余7株均为Aeromonas hydrophila[12]。
1.5防治对策
预防温和气单胞菌感染需多维度协同：日常注重个人卫生，勤用肥皂洗手，无洗手条件时使用手消毒剂；安全处理食物，避免生食或食用未煮熟的海鲜等潜在污染食物，规范食物储存与烹饪；规避污染水源，接触泳池、河流等水域时避免吞咽污水；做好伤口护理，及时用肥皂和水清洁伤口，出现感染迹象立即就医；合理使用抗生素，严格遵循医嘱用药并完成完整疗程；临床等场所强化环境管控，落实卫生清洁措施，降低医源性感染风险。通过个人卫生、饮食安全、水源防护、医疗规范等综合手段，可有效预防温和气单胞菌感染及传播。
参考文献
[1] 赵安敏, 高鹏, 赵刚 等. 温和气单胞菌的调查和鉴定. 疾病监测, 1994, 9: 12-13+16.
[2] 张山. 鲫鱼温和气单胞菌的分离鉴定与生物学特性分析. 安徽农业大学, 2020.
[3] https://tse1-mm.cn.bing.net/th/id/OIP-C.4JqvNGqUOGy1ipizVNQFlQHaFj?rs=1&pid=ImgDetMain.
[4] 彭小倩, 任朝颖, 邓雪玥 等. 杂交鲟源温和气单胞菌的分离鉴定及生物学特性的研究 .淡水渔业, 2023, 53: 62-70.
[5] 钟有光. 气单胞菌及其感染流行状况. 医学信息旬刊, 2011, 24: 1233-1234.
[6] 吕爱军, 李槿年, 余为一. 嗜温气单胞菌研究进展. 中国动物检疫, 2000: 42-43.
[7] Donta S T, Haddow A D. Cytotoxic activity of Aeromonas hydrophila. Infect Immun, 1978, 21: 989-993.
[8] 朱大玲, 李爱华, 江建国 等. 嗜水气单胞菌毒力与毒力基因分布的相关性.中山大学学报: 自然科学版, 2006, 45: 82-85.
[9] 刘希成, 张彦民. 革兰氏阴性菌外膜蛋白的研究进展. 动物医学进展, 2000, 21: 35-39.
[10] Cristi L.G, Amin A.F, Jian S et al. Aeromonas hydrophila Cytotoxic Enterotoxin Activates Mitogen-activated Protein Kinases and Induces Apoptosis in Murine Macrophages and Human Intestinal Epithelial Cells. J Biol Chem, 2004, 279: 37597-37612.
[11] 黄冠军, 刘天强, 刘衍鹏 等. 温和气单胞菌PCR快速诊断方法的建立. 淡水渔业, 2012: 89-92.
[12] Daily OP, Joseph SW, Coolbaugh JC et al. Association of Aeromonas sobria with human infection. J Clin Microbiol, 1981, 13: 769-777.