**布氏锥虫（Trypanosoma brucei）**

物种名：布氏锥虫

拉丁学名：Trypanosoma brucei

分类学地位：真核生物界Eukaryota；眼虫门Euglenozoa；

动基体纲Kinetoplastea；锥虫目Trypanosomatida；

锥虫科Trypanosomatidae；锥虫属Trypanosoma

布氏锥虫（Trypanosoma brucei）包括布氏锥虫指名亚种（T. b. brucei）、布氏锥虫冈比亚亚种（T. b. gambiense）、布氏锥虫罗得西亚亚种（T. b. rhodesiense）、布氏锥虫伊氏亚种（T. b. evansi）和布氏锥虫马媾疫亚种（T. b. equiperdum）等5个亚种，其中布氏锥虫冈比亚亚种和布氏锥虫罗得西亚亚种，属人体涎源性锥虫，是非洲锥虫病（African trypanosomiasis）或称昏睡病（sleeping sickness）的病原体，早期临床表现为长期不规则发热，全身淋巴结肿大、皮疹、晚期以神经系统症状为主，有严重头痛、反应迟钝、肌肉震颤、昏睡以至昏迷死亡，传播媒介为舌蝇。

1.1生物学特性

1.1.1生活史

当受感染的采采蝇（舌蝇属Glossina）叮咬哺乳动物宿主并吸血时，布氏锥虫会将后循环锥虫（metacyclic trypomastigotes）注入宿主的皮肤组织。这些寄生虫随后进入淋巴系统，并进一步进入血液循环。在宿主体内，它们转变为血流锥虫（bloodstream trypomastigotes），被运送至全身各处，并可到达其他体液，如淋巴液和脑脊液，通过二分裂方式进行增殖。布氏锥虫的整个生活史均以细胞外阶段存在。当采采蝇再次叮咬受感染的哺乳动物宿主吸血时，会吸入血流锥虫，从而自身被感染。在采采蝇的中肠内，寄生虫转变为前循环锥虫（procyclic trypomastigotes），经二分裂增殖，随后离开中肠并转变为上鞭毛体（epimastigotes）。这些上鞭毛体到达蝇的唾液腺，继续通过二分裂繁殖。锥虫在蝇体内的发育周期约为3周。此外，若孕妇在妊娠期间感染，则罕见情况下可发生先天性传播（主要见于布氏冈比亚锥虫）^[1]。

图1 布氏锥虫生活史^[1]

1.1.2形态学特征

在人体内以锥鞭毛体（trypomastigote）的形式寄生，具有多态性的特点，可分为细长型、粗短型和中间型。细长型大小为（20-40）μm × （1.5-3.5）μm，前端较尖细，有一根长可达6 μm的游离鞭毛，动基体位于虫体后部近末端；粗短型大小为（15-25） μm × 3.5 μm，游离鞭毛短于1 μm，或不游离；中间型长20-30 μm。锥鞭毛体在姬姆萨或瑞特染色的血涂片中，胞质呈淡蓝色，内有深蓝色的异染质（volutin）颗粒。有1个细胞核，位于虫体中央稍偏处，呈红色或红紫色。动基体为深红色，点状，位于虫体近后端。鞭毛起自基体，伸出虫体后，与虫体表膜相连。当鞭毛运动时，表膜伸展，形成被染为淡蓝色的波动膜^[2]。

图2 布氏锥虫形态结构^[3]

1.1.3生化特征

布氏锥虫经50°C热处理5分钟即可100%致死，且正常高压灭菌条件（121°C、15分钟）足以彻底灭活。0.05%次氯酸钠、0.2%TriGene消毒剂、0.1%洗手液浸泡5分钟可完全致死，15%及以上乙醇溶液5分钟内也能杀灭该虫。布氏锥虫渗透压调节能力弱，80%浓度纯水造成的低渗胁迫可使其全部失活^[4]。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

冈比亚锥虫集中在中西非，病例占全球98%；罗得西亚锥虫分布东、南非，近年已扩散至乌干达形成重叠疫区。传播以采采蝇叮咬为主要途径，还存在母婴、输血、器官移植传播途径。传染源方面，冈比亚型主要为患者和带虫者；罗得西亚型除患者外，还包括黄牛、羚羊、山羊、猴等动物^[5]。

1.2.2致病性

锥虫侵入人体后，先在血液和淋巴系统寄生繁殖，后进入中枢神经系统。绝大部分组织损伤和病理变化系由免疫反应所引起。

锥虫病的明显病理变化为B淋巴细胞增生，形成早期的淋巴结病变和脑、心脏等的淋巴细胞浸润，并可导致免疫球蛋白（IgM为主）增加和免疫复合物的出现。虽然IgM大量增加，特异性抗体能凝集锥虫，使之易被吞噬细胞吞噬或在补体参与下促使锥虫溶解，导致血中锥虫数下降，但由于锥虫抗原常发生变异，又能使锥虫变异株逃避宿主免疫作用，血中具有新抗原的锥虫数又复增加。因此血中虫数反复出现时高时低的现象。循环和组织的免疫复合物可引起广泛病变，包括贫血、补体激活、各脏器组织（尤其是中枢神经系统、心、肝等）的损害以及免疫反应的干扰。

早期淋巴结和脾脏呈一般增生，伴淋巴细胞、大单核细胞和浆细胞浸润，晚期细胞浸润减少，而代以结缔组织。病程早期中枢神经系统仅脑膜有淋巴细胞浸润，以后脑实质有淋巴细胞、浆细胞以及桑椹细胞（变形浆细胞）浸润。病变继续发展时，可出现全脑炎，脑白质和周围神经出现脱髓鞘现象，最后导致皮层下萎缩。心外膜及内膜可有出血和淋巴细胞，浆细胞浸润，心肌炎常存在，多见于罗得西亚锥虫病，也可有心包炎。肝脏有充血、出血和局灶性坏死，灶性肾小球肾炎也可发生。患者贫血主要为溶血性，红细胞上有补体成分，此外红细胞形成抑制和单核-吞噬细胞系统活性增强也是造成贫血的因素^[6]。

1.3检测方法

传统方法：依据WS/T 10055-2026《非洲锥虫病诊断》卫生行业标准，针对血液、淋巴液、水体类稀释样本可先离心富集沉淀，再制作薄涂片，采用吉氏或瑞氏染色后光学显微镜观察，依据虫体形态判定；脑脊液、下疳抽吸液等样本同样经离心浓缩后染色镜检识别锥鞭毛体。该方法适用于各类含虫体液、污染水体样本的初筛鉴定，可区分细长、粗短型布氏锥虫典型形态^[5]。
分子生物学方法：Van Reet等^[7]针对Trypanozoon亚属中常用的布氏锥虫重复序列（Trypanosoma brucei repeat，TBR）并非完全同质、存在176 bp与177 bp两类重复序列且具有单核苷酸多态性和拷贝数差异的问题，建立了多重实时荧光定量PCR（qTBR）检测体系。该体系以TBR重复序列为主要靶标，采用1条共用正向引物qTBR-F，分别配置针对177 bp和176 bp TBR序列的特异性反向引物q177T-R、q176T-R及对应水解探针q177T-P、q176T-P，在同一反应中同时扩增两类TBR靶序列；同时结合18S rDNA实时荧光PCR（q18S）作为内部参照，通过ΔCq法计算不同TBR靶序列的相对拷贝数。研究所用引物与探针序列见表1。qPCR反应总体积为20 μL，含1×PerfeCTa qPCR ToughMix、各300 nM正反向引物、100 nM探针和5 μL寄生虫DNA；扩增程序为45℃ 5 min、95℃ 10 min，随后35个循环（95℃ 15 s、60℃ 1 min）。方法性能评价中，研究者首先采用两株T. b. gambiense I型克隆DNA进行10倍梯度稀释试验，177 bp TBR靶标可检测低至5 fg的寄生虫DNA，不同单重、双重和三重反应中重复测定的Cq值差异较小，多数体系扩增效率对应的标准曲线斜率为-3.1～-3.6，显示出较好的扩增性能和重复性。随后对77株Trypanozoon菌株或克隆进行检测，结果表明176 bp和177 bp TBR序列的相对拷贝数在不同类群间存在明显差异。将q177T与q176T的相对拷贝数联合分析，可将菌株大致划分为TBR-East、TBR-West和TBR-Central三种基因型。该方法利用两类TBR序列的SNP和拷贝数变异，在提高Trypanozoon检出覆盖度的同时还能提供一定的基因分型信息，尤其可减少传统仅针对单一TBR序列时可能出现的漏检。

表1 布氏锥虫qTBR检测方法引物与探针序列^[7]

名称	序列（5′→3′）
qGPI-PLC-F	CCCACAACCGTCTCTTTAACC
qGPI-PLC-R	GGAGTCGTGCATAAGGGTATTC
qGPI-PLC-P	ACACCACTTTGTAACCTCTGGCAGT
M18S II-F	CGTAGTTGAACTGTGGGCCACGT
M18S II-R	ATGCATGACATGCGTGAAAGTGAG
q18S-P	TCGGACGTGTTTTGACCCACGC
c177-F	GCAACAAAGCTATTTAATGGTCCT
c177-R	GCACACTTGTAATTAATATGGCACA
q177D-P	TGCGCAGTTAACGCTATTATACACA
c176-F	GTGCAACAAAGCTAATAAATGGTTC
c176-R	TAAAGAACAGCGTTGCAAACTT
qTBR-F	CGCAGTTAACGCTATTATACA
q177T-R	GGACCATTAAATAGCTTTGTTG
q177T-P	TGCCATATTAATTACAAGTGTGC
q176T-R	GAACCATTTATTAGCTTTGTTG
q176T-P	TGCAACGCTGTTCT

1.4典型案例

2022年，埃塞俄比亚南部Gamo地区Kucha Alfa区报告4例由布氏锥虫罗得西亚亚种（T. b. rhodesiense）引起的人非洲锥虫病，这是埃塞俄比亚约30年来再次报告该病^[8]。4名患者均来自奥莫河附近农村地区；该区域靠近奥莫河及Maze国家公园，河岸和灌丛环境适宜采采蝇繁殖，牛等家畜到河边饮水，周边同时存在野生动物和家畜储存宿主，使人、媒介和动物宿主在河流沿岸生态环境中发生接触的机会增加。病例最初通过血涂片显微镜检查发现锥虫，其中1例保存的干血斑样本进一步经分子生物学方法确认病原体为T. b. rhodesiense。4例中2例在特效药获得前死亡，另1例治疗过程中因脑病死亡，1例经治疗存活；病例报告后，埃塞俄比亚卫生部门与世界卫生组织成立工作组，协调病例管理和报告。

1.5防治对策

防治锥虫病的主要措施包括早期发现、治疗患者和控制舌蝇密度。改变媒介昆虫滋生环境，如清除灌木林、喷洒杀虫剂等措施。治疗药物苏拉明（suramin）对两种锥虫病早期疗效良好：喷他脒对早期布氏冈比亚锥虫病疗效好：美拉胂醇为三价砷制剂，对两种锥虫病各期均有效，但毒性大，只用于晚期患者^[2]。

参考文献

[1] Centers for Disease Control and Prevention (CDC). https://www.cdc.gov/dpdx/trypanosomiasisafrican/.

[2] 李士根, 木兰. 人体寄生虫学实验与学习指导. 南京: 江苏凤凰科学技术出版社, 2024.

[3] Public Health Image Library (PHIL). https://wwwn.cdc.gov/phil/Details.aspx?pid=14822.

[4] Wang X, Jobe M, Tyler K M et al. Efficacy of common laboratory disinfectants and heat on killing trypanosomatid parasites. Parasites & Vectors, 2008, 1: 35.

[5] Centers for Disease Control and Prevention. https://www.cdc.gov/dpdx/trypanosomiasisafrican/.

[6] 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所. https://www.ipd.org.cn/know27.html.

[7] Van Reet N, Patient Pyana P, Dehou S et al. Single nucleotide polymorphisms and copy-number variations in the Trypanosoma brucei repeat (TBR) sequence can be used to enhance amplification and genotyping of Trypanozoon strains. PloS One, 2021, 16: e258711.

[8] Abera A, Mamecha T, Abose E et al. Reemergence of Human African Trypanosomiasis Caused by Trypanosoma brucei rhodesiense, Ethiopia. Emerging Infectious Diseases, 2024, 30: 125-128.