溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)
物种名:溶组织内阿米巴
拉丁学名:Entamoeba histolytica
分类学地位:真核生物界Eukaryota;变形虫门Amoebozoa;
古阿米巴纲Archamoebae;鞭毛变形虫目Mastigamoebida;
内阿米巴科Entamoebidae;内阿米巴属Entamoeba
溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica),也称痢疾阿米巴,主要寄生于结肠,在一定条件下可侵入肠壁组织或其他器官组织,分别引起肠阿米巴病与肠外阿米巴病。
1.1生物学特性
1.1.1生活史
溶组织内阿米巴的生活史简单,只有包囊和滋养体两个时期,四核包囊为感染阶段,人因误食被四核包囊污染的食物或饮水后感染(图1)。包囊能抵抗胃酸的作用,当进入小肠下段或结肠,经碱性消化液和酶的作用,囊壁破裂,含四个核的滋养体脱囊逸出。四核滋养体经一次核分裂和胞浆的分配繁殖成8个肠腔型滋养体,随即在结肠上段以摄食细菌及淀粉粒等为营养,不断二分裂繁殖。当肠腔型滋养体移行至结肠下端时,随着肠内容物水分不断被吸收和环境变化等因素的刺激,虫体形成圆形的前包囊,然后外质分泌厚的囊壁,形成单核包囊,再经二次有丝分裂后形成四核包囊,随粪便排出体外[1]。
当宿主的抵抗力下降、肠壁受损或肠功能紊乱时,肠腔型滋养体可借助伪足运动及其酶和毒素的作用侵入肠壁组织,虫体增大变为组织型滋养体,大量繁殖破坏肠黏膜组织并吞噬红细胞,使局部肠黏膜和组织坏死形成溃疡;肠壁组织内的组织型滋养体可随坏死组织落入肠腔,随粪便排出体外而死亡;也可在肠腔中变为肠腔型滋养体排出体外,或者再形成包囊而排出体外;组织型滋养体有时也可从肠壁进入肠黏膜下的血管,随血流至肝、肺和脑等组织内进行增殖,引起相应脏器的病变。肠外组织内的组织型滋养体不能变成包囊,当离开组织时,迅速死亡[2]。

图1 溶组织内阿米巴生活史[1]
1.1.2形态学特征
(1)滋养体(trophozoite):滋养体为虫体活动期,形态多变而不规则,运动时常伸出一伪足,进行定向阿米巴运动。从有症状患者脓血便和组织中分离出的滋养体,大小在20-40 μm,有的可达60 μm,细胞外质为透明的凝胶状,内质为颗粒状常含有摄入的红细胞,有时可见白细胞和细菌。经铁苏木素染色后,可见滋养体有一个圆形的泡状核,直径为4-7 μm,核膜内缘有一单层、大小均匀,排列整齐的核周染色质粒;核仁位于核中央,其与核膜间呈现网状的核纤维(图2A和2B)[3]。
(2)包囊(cyst):包囊的直径为5-20 μm,平均为12 μm。滋养体在肠外脏器或在外环境不能形成包囊,只有在肠腔内的滋养体向肠道远端移行过程中,经历囊前期的虫体分泌厚的成囊物质包绕虫体,成为单核的圆球形或类圆形的包囊。未成熟包囊为1-2个核,经铁苏木素染色后,可见棒状形、两端钝圆的拟染色体,以及在染色过程中被溶解为空泡的糖原泡,核的结构与滋养体的核相似。成熟包囊有4个核,糖原泡和拟染色体常已消失,含有4个核的成熟包囊为感染期(图2C)[3]。

图2 溶组织内阿米巴显微照片[3]
A:滋养体,B:单个滋养体形态,C:包囊
1.1.3生化特征
溶组织内阿米巴包囊在外界环境中具有较强的生存力,在潮湿低温环境中,能存活12天以上,在水中可存活9-30天。
1.2分布、传播与致病性
1.2.1分布与传播
溶组织内阿米巴为世界性分布,以热带和亚热带地区较多。我国各地均有分布,农村多于城市。感染主要通过人与人之间的传播、经口感染。水源被含有包囊的粪便所污染是主要的传播环节,其次是手指、食物或用具的污染[2]。
1.2.2致病性
溶组织内阿米巴的致病作用与原虫毒力、寄生微环境的理化因素和生物因素以及宿主机体状态有关。毒力作用是通过黏附、酶溶、细胞溶解以及协同损伤过程来完成的。溶组织内阿米巴滋养体可借其表面的凝集素等黏附于宿主细胞,通过组织溶解酶(主要为半胱氨酸蛋白酶)及分泌的阿米巴穿孔素引起细胞溶解,并吞有关细胞;粒细胞被滋养体触溶后释出有毒物质而加剧组织破坏,也起协同作用。虫体的组织溶解酶尚可降解补体成分,抵抗补体的溶解作用。人被感染后可出现无症状带虫状态或急性疾病[2]。
在人体机能良好的情况下,溶组织内阿米巴肠腔型滋养体通常在肠腔内生活,不断增殖形成包囊,多数人成为无症状的带虫者。仅有5-15%的人由于宿主营养不良、感染、肠粘膜损伤等因素致使机体抵抗力降低,原虫分泌溶组织酶,以伪足运动侵入肠粘膜或粘膜下层生长繁殖成为组织型滋养体,导致组织液化、坏死,形成口小底大烧瓶样溃疡。其坏死组织、脓血粘液和滋养体一起落入肠腔,患者则出现痢疾症状,表现为腹泻、大便次数增多,排红色脓血粘液便,气味腥臭。病变部位以盲肠和升结肠为多见,乙状结肠和直肠次之。慢性患者常有轻微的腹痛、腹胀、腹泻与便秘交替出现,故常在稀便中查见肠腔型滋养体。在肠粘膜下层或肌层的组织型滋养体,可侵入静脉,随血流至肝、肺、脑等部位引起阿米巴脓肿,以肝脓肿最为常见,肺脓肿多继发于肝脓肿,其他部位的感染则罕见[3]。
1.3检测方法
- 传统方法:溶组织内阿米巴的传统检测方法以显微镜检查为主,可对粪便标本开展直接涂片、福尔马林-乙醚浓缩后镜检,是肠道寄生虫诊断的常用手段,但该方法敏感性仅约60%,且无法区分形态相近的溶组织内阿米巴、迪斯帕内阿米巴和莫什科夫斯基阿米巴[4]。
- 分子生物学方法:Zebardast等针对溶组织内阿米巴建立了多重PCR与qPCR‑MCA两种分子检测方法,可实现其与迪斯帕内阿米巴、莫什科夫斯基阿米巴的精准区分,弥补了镜检敏感性低、无法分型的不足。多重PCR以18S rRNA与CP8基因为靶标,单管完成扩增与鉴别;qPC-MCA采用SYBRGreen荧光染料,通过熔解曲线区分物种,无需探针、成本更低,且无需凝胶电泳,降低污染风险,两种方法均具有较高特异性与诊断价值[4]。
表1 溶组织内阿米巴检测所用引物序列
| 名称 | 序列(5′→3′) | 靶基因 |
| EntaF | ATGCACGAGAGCGAAAGCAT | 18S rRNA |
| EhR | GATCTAGAAACAATGCTTCTCT | 18S rRNA |
| EHCP‑S1 | ATTTGTTAAGTATTGTAAATGGG | CP8 |
| EHCP8‑AS1 | ATTGTAACCTTTCATTGTAACAT | CP8 |
1.4典型案例
1988至1991年,我国首次开展覆盖30个省(区、市)、726个县、近148万人的溶组织内阿米巴感染流行病学调查。结果显示,该病呈全国性分布,平均感染率为0.95%,西藏、云南、新疆、贵州、甘肃感染率超2%。感染存在年龄、性别、民族与职业差异,女性、农牧民感染风险更高,干旱地区及饮用涝坝水与感染显著相关,部分地区呈家庭聚集性,提示需加强饮水安全与卫生防控[5]。
1.5防治对策
阿米巴病主要是因摄入被包囊污染的水源或食物而感染,因此加强健康教育,注意饮食、饮水和个人卫生;加强粪便管理和水源保护,并通过灭蝇、灭蟑螂等切断传播途径;积极治疗病人和带虫者,首选药物为甲硝唑,也可选用双碘羟基啉、盐酸吐根素、氯喹等。
参考文献
[1] El-Dib, Nadia A. Entamoeba histolytica: an Overview. Current Tropical Medicine Reports, 2017, 4: 1-10.
[2] 马新博, 运晨霞, 石学魁 等. 医学免疫学与病原生物学. 西安: 西安交通大学出版社, 2022.
[3] Walochnik JM, Duchêne. Molecular parasitology: Protozoan parasites and their molecules. Springer, 2016.
[4] Zebardast N, Yeganeh F, Gharavi MJ et al. Simultaneous detection and differentiation of Entamoeba histolytica, E. dispar, E. moshkovskii, Giardia lamblia and Cryptosporidium spp. in human fecal samples using multiplex PCR and qPCR-MCA. Acta Tropica, 2016, 162: 233-238.
[5] 蒋则孝, 许隆祺, 余森海 等. 中国溶组织内阿米巴感染的状况. 中国寄生虫病防治杂志, 1997, 10: 264-268.
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