人副肠孤病毒（Human parechovirus）

物种名：人副肠孤病毒

拉丁学名：Human parechovirus

分类学地位：正核糖病毒界Orthornavirae；小核糖病毒门Pisuviricota；

小南嵌套病毒纲Pisoniviricetes；微小核糖病毒目Picornavirales；

微小核糖病毒科Picornaviridae；副肠孤病毒属Parechovirus

人副肠孤病毒（Human parechovirus, HPeV）于1956年首次被分离出来，直到1997年才被归入单独的副肠孤病毒属，目前分为19种基因型，即HPeV1-19。该病毒经常导致幼儿患胃肠道或呼吸系统疾病，主要通过粪口途径传播。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

研究表明，不同HPeV基因型的培养结果各不相同。HPeV1可以在各种细胞系上培养，如BSC-1、Caco2、RD-18S、Vero、LLCMK2、RD99、HT29、tMK和A549，而其他较新的HPeV仅在有限数量的细胞系上诱导微弱的细胞病变效应（CPE）^[1]。

1.1.2形态学特征

人副肠孤病毒颗粒呈球形，直径大约是28 nm，无包膜，全长大约7300个核苷酸，为单股正链RNA病毒。人副肠孤病毒衣壳由60个原聚体结构组成，衣壳蛋白呈二十面体立体对称。人副肠孤病毒基因组分为四个不同的区域：一个长开放阅读框（ORF），一个5’非翻译区（5′-UTR），一个3’非翻译区（3′-UTR）和一个polyA尾。ORF由3个区域构成（P1、P2和P3），P1区包括3个衣壳蛋白（VP0、VP3和VP1）（图2）、P2区包括3个非结构蛋白（2A、2B和2C）和P3区包括4个非结构蛋白（3A、3B、3C和3D）^[3]。

图1 人副肠孤病毒冷冻电镜三维结构模型和抗体AT12-015阻断人副肠孤病毒3型（HPeV3）与HT29细胞结合的免疫荧光显微图^[2]

图2 人副肠孤病毒结构示意图^[3]

1.1.3生化特征

人副肠孤病毒具有较强的稳定性，在胃肠道能耐受胃酸、蛋白酶和胆汁的作用，体外可耐受乙醚、去垢剂等脂溶剂，在pH 3-9范围内保持稳定。该病毒在粪便中室温下可存活数周，而鼻咽/呼吸道排毒时间相对较短，较不易长期存留^[4]。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

人副肠孤病毒主要通过粪-口途径和呼吸道传播，其中粪-口传播途径可能涉及被病毒污染的饮用水或娱乐用水（如游泳池），尤其是在卫生条件不足或污水处理不完善的情况下。人副肠孤病毒可在普通人群中流行，但感染对象主要是儿童。人副肠孤病毒感染范围广泛，日本、荷兰、巴基斯坦、巴西、中国等多个国家均报道过该病毒的感染，其流行季节因基因型存在差异^[5]。

1.2.2致病性

目前已发现19种基因型^[3]，大多数型别的人副肠孤病毒（HPeV）均可侵犯消化道，主要引发腹泻病，表现为腹泻、腹胀、呕吐等。其中HPeV1是广泛分布和流行的优势毒株，引发的胃肠道症状轻微。侵犯中枢神经系统的主要是HPeV3。感染对象主要是婴幼儿（尤其是3个月以内），可导致严重的中枢神经系统疾病，如脑炎、脑膜炎、急性弛缓性麻痹等。HPeV感染引发的呼吸道症状无特异性，主要表现为流涕、咳嗽、呼吸急促或暂停及哮喘等。HPeV感染常常伴随其他症状，如发热、易激惹、皮疹、心肌炎及喂养困难等^[5]。

人类副肠孤病毒的致病机制尚未完全明确。其中HPeV3被认为是引起新生儿及婴幼儿中枢神经系统感染的主要亚型。值得注意的是，临床观察显示，HPeV3相关中枢神经系统感染患儿常无脑脊液细胞增多现象，提示其脑损伤机制可能不依赖典型的炎症反应，这一现象仍需进一步的机制性研究加以解释。

1.3检测方法

（1）传统方法：细胞培养法是鉴定病毒感染的经典方法。目前已知的可作为分离HPeV的细胞系有Vero细胞、BGM细胞、LLC-MK2细胞、MDCK细胞、L20B细胞等。该方法周期较长，不适合快速诊断^[5]。

（2）分子生物学法：Nix等开发了一种实时荧光定量反转录PCR方法，用于检测人副肠孤病毒（HPeV1-6）及Ljungan病毒（Ljungan virus, LV），PCR方法靶向副肠孤病毒保守的5’非翻译区，可在多种原始标本类型中灵敏检测HPeV1至HPeV6以及LV。该方法靶向5’非翻译区的保守序列，通过设计简并引物和探针实现广谱检测，详细序列见表1，检测结果灵敏度为1个RNA拷贝/反应，且特异性强，不与其他肠道病毒或心病毒交叉反应^[6]。

表1 人副肠孤病毒实时荧光定量反转录PCR引物序列^6]

名称	序列（5’→3’）
AN345	5′-GTAACASWWGCCTCTGGGSCCAAAAG-3′
AN344	5′-GGCCCCWGRTCAGATCCAYAGT-3′
AN257	5′-CCTRYGGGTACCTYCWGGGCATCCTTC-3′

1.4典型案例

泰国清迈2016至2018年环境水监测研究发现，人副肠孤病毒（HPeV）在126份水样中经的实时PCR检测方法检出率为3.2%，主要分布于废水（Mae Kha Canal）和灌溉水（Suandok Canal）。基因型分析显示，检出的HPeV包括HPeV1、HPeV5和HPeV6，其中HPeV1占50%。时间分布上，病毒在雨季（如12月、10-11月）更易检出，可能与污水溢流相关。并且在检测的13种肠道病毒中，HPeV占比2.2%，低于诺如病毒（36.8%），但高于轮状病毒（0.5%）^[7]。

1.5防治对策

加强卫生管理与环境消毒，落实手卫生、呼吸道礼仪，定期用含氯消毒剂等消毒高频接触表面，保障饮用水安全且避免污水污染；构建三级预防监测网络，扩大监测哨点，追踪人副肠孤病毒毒力与传播变化；严格新生儿感染防控，记录病史，隔离患儿并处理污染物；关注秋冬季节及HPeV3隔年流行时的监控，基层医疗机构对相关症状儿童预检分诊，排查患儿接触人群；建立流动监测体系，强化幼儿园、学校等儿童聚集场所监测，及时报告预警；加强宣传教育，普及防控知识，提高预防意识^[3]。

参考文献

[1] Westerhuis BM, Jonker SC, Mattao S et al. Growth characteristics of human parechovirus 1 to 6 on different cell lines and cross-neutralization of human parechovirus antibodies: a comparison of the cytopathic effect and real time PCR. Biology and Medicine, 2013, 10: 146.

[2] Domanska A, Flatt JW, Jukonen JJJ et al. A 2.8-Angstrom-Resolution Cryo-Electron Microscopy Structure of Human Parechovirus 3 in Complex with Fab from a Neutralizing Antibody. Journal of Virology, 2019, 93: e01597-18.

[3] Olijve L, Jennings L, Walls T. Human Parechovirus: an increasingly recognized cause of sepsis-like illness in young infants. Clinical Microbiology Reviews, 2017, 31: e00047-17.

[4] 贾文祥. 医学微生物学第2版. 成都: 四川大学出版社, 2009.

[5] 罗雷, 朱汝南. 人副肠孤病毒的研究进展. 中国病毒病杂志, 2013, 3: 310-316.

[6] Nix WA, Maher K, Johansson ES et al. Detection of all known parechoviruses by real-time PCR. Journal of Clinical Microbiology, 2008, 46: 2519-24.

[7] Kumthip K, Khamrin P, Ushijima H et al. 2023. Detection of Six Different Human Enteric Viruses Contaminating Environmental Water in Chiang Mai, Thailand. Microbiology Spectrum, 2023, 11: e0351222.