1.狂犬病病毒（Rabies virus, RABV）

物种名：狂犬病病毒

拉丁学名：Rabies lyssavirus

分类学地位：病毒界Riboviria；负核糖病毒门Negarnaviricota

单股反链病毒纲Monjiviricetes；单股负链目Mononegavirales；

弹状病毒科Rhabdoviridae；狂犬病毒属Lyssavirus

狂犬病是由狂犬病病毒（Rabies virus，RABV）引起的人兽共患病，病毒主要通过被感染的动物咬挠伤进行传播，侵入宿主的中枢神经系统后造成不可逆损伤。狂犬病一旦发生，致死率可达100%^[1]。

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

狂犬病病毒可在鼠源神经母细胞瘤（NA）细胞、Vero细胞或BHK-21细胞中复制，最适培养温度34-37℃。感染后24-48 h出现典型细胞病变效应（CPE）：细胞变圆、拉丝、脱落；用荧光抗体染色可在胞浆内观察到苹果绿色颗粒状荧光^[2]。经典小鼠颅内接种法亦可分离病毒，3-7 d小鼠出现震颤、麻痹、死亡^[3]。

图1 狂犬病毒粒子

1.1.2形态学特征

病毒粒子呈子弹状，长约130-300 nm，直径约75 nm；外被脂质包膜，表面密布糖蛋白G刺突；核衣壳内含单股负链RNA（约12 kb），与核蛋白N紧密缠绕形成螺旋对称结构^[3]。电镜下可见一端平截、一端圆滑，形态特征明显。

图2 狂犬病毒形态特征

1.1.3生化特征

狂犬病病毒缺乏完整酶系统，依赖宿主细胞完成RNA转录与复制；病毒粒子内含依赖RNA的RNA聚合酶（L蛋白）。病毒对乙醚、氯仿、β-丙内酯敏感，pH＜3迅速灭活，56℃ 1 h完全失去感染力^[4]。

1.1.4分子生物学特征

基因组为单股负链RNA，全长约11932 nt，编码5个结构基因：N（核蛋白）、P（磷蛋白）、M（基质蛋白）、G（糖蛋白）和L（RNA聚合酶）。G基因序列常用于毒株分型和系统进化分析；N基因高保守区是RT-qPCR诊断靶标^[5]。

1.2分布、传播与致病性

1.2.1分布与传播

狂犬病病毒呈全球性分布（除南极洲及少数无疫岛屿外）。储存宿主包括犬、猫、蝙蝠、狐狸、浣熊、臭鼬等，其中犬科动物是发展中国家的主要传染源。病毒大量存在于感染动物的唾液中，通过咬伤、抓伤或黏膜接触传播给人类。病毒沿外周神经向中枢神经系统迁移，潜伏期通常20-90 d，短者仅数天，长者可达数年^[6]。

1.2.2致病性

病毒首先在外周神经肌肉接头处与乙酰胆碱受体结合，经轴浆逆行至脊髓和大脑，引起急性脑脊髓炎。临床经过分前驱期、兴奋期、麻痹期，典型症状包括恐水、怕风、痉挛、意识障碍，最终因呼吸循环衰竭死亡。一旦出现临床症状，病死率接近100%。暴露后及时彻底清洗伤口并联合狂犬病疫苗与被动免疫制剂（RIG）可有效阻断发病^[7]。

1.3检测方法

直接荧光抗体法（DFA）^[8]：适用范围包括动物或人死后脑组织（脑干+小脑）现场快速确诊；灵敏度与特异度均＞99%，被WHO、OIE、中国疾控中心列为“金标准”。

操作原理：用FITC标记的抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体与脑组织印片孵育；荧光显微镜下可见胞浆苹果绿色颗粒即为阳性。检测时间：2-4 h可出结果。

1.4典型案例

2021年，秘鲁亚马逊部落群体感染^[9]。危害：至少7人感染死亡（均为原住民儿童），蝙蝠叮咬传播。病原体是否超标：当地吸血蝙蝠种群狂犬病毒携带率超常达10%（正常＜1%），引发社区暴发。处置结果：紧急为2000名居民接种人用狂犬疫苗；政府扑杀高感染率蝙蝠群落，加强动物监测。

1.5防治对策

（1）加强犬只管理：普及犬只登记、疫苗年免，流浪犬捕捉-绝育-放归或人道处置。

（2）暴露后处置：立即用肥皂水和流动水交替冲洗伤口至少15 min，再用碘伏消毒；全程接种狂犬病疫苗，Ⅲ级暴露需加用狂犬病被动免疫制剂（RIG）。

（3）监测与预警：建立动物狂犬病哨点监测，发现异常死亡及时采样送检，实现“早检测、早预警、早处置”。

1.6危害等级与标准限值

（1）危害等级

狂犬病病毒在《人间传染的病原微生物名录》中列为危害程度第二类-Risk Group 3，对应实验室生物安全等级BSL-3（活病毒操作）；动物感染实验需ABSL-3。致死率：一旦出现临床症状，病死率近100%；暴露后规范处置可降至0。感染剂量：人类最低感染剂量尚未确定，但动物实验提示<10 TCID₅₀即可致病，远低于志贺氏菌“10-100个菌”的极低量。

（2）标准限值

中国：现行《地表水环境质量标准》（GB 3838-2021）、《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2022）均未将狂犬病病毒列为必检项目，无浓度限值；如需应急监测，可参照GB/T 39730-2020《狂犬病病毒核酸检测方法》进行RT-qPCR检测。

欧盟：饮用水指令(EU) 2020/2184未设病毒限值；推荐WHO实时RT-qPCR方法。

美国：EPA饮用水法规未设狂犬病病毒指标；CDC推荐RT-qPCR与DFA联合检测。

WHO：《饮用水水质准则》第四版指出，狂犬病病毒“不通过饮用水传播”，但建议对可疑动物脑组织采用DFA+RT-qPCR双法确认。

参考文献

[1] 赵韩, 莫若, 王琼 等. 狂犬病病毒VHH抗体库的构建、表达及鉴定. 中国病原生物学杂志, 2025, 20: 836-840.

[2] WHO. Laboratory Techniques in Rabies, 5th ed. Geneva: WHO Press, 2021.

[3] CDC. Rabies Laboratory Manual. Atlanta: US Department of Health, 2020.

[4] OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. Paris: OIE, 2021.

[5] WHO. WHO Standard Protocol for Real-time RT-PCR Detection of Rabies Virus. Geneva: WHO; 2018.

[6] WHO. Rabies vaccines: WHO position paper – April 2022. Wkly Epidemiol Rec, 2022, 97: 129-156.

[7] CDC. Expert Consensus on Clinical Management of Human Rabies. China CDC Weekly, 2021, 3: 715-720.

[8] WS 281-2017 狂犬病诊断标准

[9] 《PLOS被忽视热带病》(2022)