坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)

物种名: 阪崎肠杆菌

拉丁学名:Enterobacter sakazakii

分类学地位:细菌界Bacteria;

肠杆菌目Enterobacteriales

肠杆菌科Enterobacteriaceae

阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii),也被称为阪崎氏肠杆菌或Cronobacter muytjensii,是肠杆菌科肠杆菌属的一种革兰氏阴性杆菌,是一种革兰氏阴性、非孢子形成、能动、周周杆状的细菌性食源性病原体,属于肠杆菌科[1]。是一种机会性病原体,在世界范围内引起多次暴发,可引起严重的婴儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和败血症,致死率在 40% 至 80% 之间。此外,该病原体还与成人吸入性肺炎、尿路感染、脓肿、伤口、腹泻和结膜炎等多例病例有关[2]

1.1生物学特性

1.1.1培养特征

阪崎肠杆菌能在多种培养基上生长繁殖,包括普通营养琼脂、血平板、麦康凯(MAC)琼脂、伊红美兰(EMB)琼脂和脱氧胆酸琼脂等。生长最佳温度为25~36℃,但在6~45℃下都能生长,某些菌株甚至能在47℃下生长。对营养要求不高,能在普通营养琼脂、血平板、麦康凯( MAC )琼脂、伊红美兰( EMB) 琼脂、脱氧胆酸琼脂等多种培养基上生长繁殖。阪崎肠杆菌具有耐热及耐寒性,在外界环境中比其他肠道杆菌生存率强,培养最佳温度25—36℃,在6~45℃下都能生长,某些菌株可在47℃下生长 。在胰蛋白胨琼脂( TSA)、脑心浸液琼脂(BHI )及血平板上经 25~36℃培养24 h后,形成1.5~2.5 mm,黄色菌落, 菌落形态有2种:一种为典型的光滑型菌落,极易被接种环移动,另一种为干燥或粘液样,周边呈放射状,不易被接种环移动,似橡胶状有弹性。后一种经传代后可转化为有光泽的菌落。

坂崎肠杆菌

1.1.2形态学特征

阪崎肠杆菌属肠杆菌科肠杆菌属,因此本菌具备肠杆菌基本形态特征:革兰阴性粗短杆菌,细胞大小为( 0.6~1.1 )×( 1.2~ 3.0 ),有周身菌毛,无芽胞,阪崎肠杆菌为革兰氏染色阴性杆菌,呈现为杆状,其大小通常(0.6~1.1)x(1.2~3.0)μm的范围内。它具有周鞭毛,表现出运动活泼的特性,阪崎肠杆菌无芽孢。

显色琼脂阪崎肠杆菌 - 培养基 - 微生物学

1.1.3生化特征

阪崎肠杆菌具有耐热、耐干燥、对渗透压的忍耐力较强等特点,可长时间生存在干燥的环境中。如果奶粉在冲调、存放时操作不当,就可能被环境中的阪崎肠杆菌污染,而被其污染的婴儿配方粉正是婴幼儿感染的主要病因食品。

1.1.4 分子生物学特征

(1)毒力因子

在克罗诺杆菌属中发现了许多毒力性状,包括与肌醇发酵的关联、HEp-2和CaCo等细胞系的侵袭和粘附、内毒素的存在、毒力基因cpa、hly和sip的检测、鞭毛以及ompA和ompX基因。

1.2.1 分布与传播

阪崎肠杆菌广泛分布于土壤、水、植物和动物的消化道中。它们在这些环境中能够生存并繁殖,但其生存环境要求也比较高,并不耐热,可通过巴斯德消毒法杀灭。阪崎肠杆菌是一种乳制品中新发现的致病菌,尤其是婴儿配方奶粉中最为常见。此外,牛肉馅、香肠、干酪、蔬菜、谷物类、豆腐、莴苣、草药和调味料等食品中也曾检测出该菌。阪崎肠杆菌最主要的感染途径是婴儿配方奶粉。由于制备过程加热灭菌不彻底,阪崎肠杆菌可能存在于奶粉中,成为婴儿感染的主要来源。在某些情况下,由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40%~80%。

1.2.2 致病性

阪崎肠杆菌主要存在于婴儿奶粉中,能引起新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症等严重疾病,有高达40%-80%的死亡率。其引发的疾病对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大。

1.2.3 耐药性

基于中国疾控中心传染病所对阪崎肠杆菌耐药的研究分析,阪崎肠杆菌对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美洛培南平、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、链霉素、卡那霉素、环丙沙星、诺氟沙星、氯霉素等抗生素敏感;对万古霉素、苯唑西林和青霉素G、头孢唑林和头孢泊肟耐药。

1.3检测方法

  1. 常规生化鉴定:基于阪崎肠杆菌的生理生化特征进行鉴定。
  2. PCR测定16SRNA:利用PCR技术扩增阪崎肠杆菌的16S rRNA基因片段,通过电泳等方法进行检测。
  3. 血清学检测::利用阪崎肠杆菌的多克隆抗体进行免疫检测。
  4. 分子生物学检验方法:包括普通PCR法和荧光PCR法等。
  5. 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法:将样品与基质混合,利用脉冲激光照射激发基质,使高分子生成分子离子及多聚体,通过质谱仪进行分离和检测,最后通过软件分析比较确定目标微生物种或菌株。
  6. 阪崎肠杆菌显色培养基:选用如HiMedia公司生产的阪崎肠杆菌显色培养基,适用于从食物、牛奶和奶制品中分离鉴定阪崎克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)。

1.4典型案例

在2001年,在广东某地区的水源受到污染,导致当地居民饮用水和食品加工用水受到阪崎肠杆菌的污染。由于阪崎肠杆菌具有耐热、耐干燥、耐高渗环境的特点,其在水源中能够存活并繁殖,进而通过饮用水和食品加工链传播给人类。食品加工过程中,阪崎肠杆菌可能污染了婴儿配方奶粉等食品,成为婴儿感染的主要来源。婴儿因食用受污染的奶粉而感染阪崎肠杆菌,出现脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症等严重疾病,甚至导致死亡。

1.5防治对策

  1. 保持良好的卫生习惯:定期洗手,使用肥皂和温水洗手至少20秒,特别是在接触动物、处理生食或用餐前后。定期清洗和消毒厨房及餐具,防止细菌滋生和交叉污染。
  2. 确保食品安全:生食处理:避免直接接触生肉、生蔬菜和未煮熟的食物。确保食物在食用前彻底煮熟,特别是肉类和禽类产品。
  3. 温度控制:冷藏食品应储存在零下5摄氏度以下,烹饪食品应达到适当的温度(通常为摄氏75摄氏度以上),确保食物的温度适宜以杀死阪崎肠杆菌。
  4. 使用安全水源:饮用水和食物加工过程中使用的水源必须安全。确保饮用水经过适当处理或来自可靠的供水系统。
  5. 避免交叉污染:使用专用切割板来处理不同类型的食物,尤其是生肉和生食。
  6. 食材在储存时要分开存放,避免不同食物之间的直接接触。

参考文献

[1] Brendan Healy, Cooney Shane, O’Brien Stephen, et al. Cronobacter (Enterobacter sakazakii ): An Opportunistic Foodborne Pathogen[J]. Foodborne Pathogens and Disease, 2010, 7(4): 339-350.

[2] W Yong, Guo B, Shi X, et al. An Investigation of an Acute Gastroenteritis Outbreak: Cronobacter sakazakii, a Potential Cause of Food-Borne Illness[J]. Front Microbiol, 2018, 92549.